ЗАДАЧА по Генетике Гибридная мышь, полученная от скрещивания чистой линии мышей с извитой шерстью (а) нормальной длины (B) с чистой линией , имеющей прямую длинную шерсть , была скрещена с самцом , который имел извитую длинную шерсть, В потомстве 40% мышей имели прямую длинную шерсть , 40% — Извитую шерсть , нормальной длины, 10% — прямую нормальной длины и 10% — извитую длинную шерсть . Определите генотипы всех особей. Составьте схемы скрещиваний . Какой закон последовательности проявляется в этом скрещивании?
Это кол-во видов в ареале.
М.Шлейден сделал свои открытия в «ЦИТОЛОГИИ»
Ну , методов борьбы с болезнетворными бактериями огромное множество:
Например картофель его привез калумб из америки Позначимо ген блакитних очей як — а, карих — як А (домінантний), світле волосся — b, темні — B. Дигибридное схрещування.АВ Аb aB ab
AB AABB AABb AaBB AaBb
Ab AABb AAbb AaBb Aabb
aB AaBB AaBb aaBB aaBb
Відповідь: 9 генотипів (ААВВ, AABb, AaBB, AaBb, AAbb, Aabb, aaBB, aaBb, aabb) і 4 фенотипу: 9 блакитні / темні : 3 карі / темні : 3 карі / світлі : 1 блакитні / світлі.
конгенные и рекомбинантные линии мышей. Задачи на анализирующее скрещивание
Скрестили дигетерозиготных самцов мух дрозофил с серым телом и нормальными крыльями (признаки доминантные) с самками с черным телом и укороченными крыльями (рецессивные признаки). Составьте схему решения задачи. Определите генотипы родителей, а также возможные генотипы и фенотипы потомства F1, если доминантные и рецессивные гены данных признаков попарно сцеплены, а кроссинговер при образовании половых клеток не происходит. Объясните полученные результаты.Дигетерозиготное растение гороха с гладкими семенами и усиками скрестили с растением с морщинистыми семенами без усиков. Известно, что оба доминантных гена (гладкие семена и наличие усиков) локализованы в одной хромосоме, кроссинговера не происходит. Составьте схему решения задачи. Определите генотипы родителей, фенотипы и генотипы потомства, соотношение особей с разными генотипами и фенотипами. Какой закон при этом проявляется?
Ответ
А — гладкие семена, а — морщинистые семена
B — наличие усиков, b — без усиков
AB
ab
ab
ab
AB
ab
ab
ab
гладкие
семена,
усы
морщинист.
семена,
без усов
50%
50%
Если кроссинговер не происходит, то у дигетерозиготного родителя образуется только два вида гамет (полное сцепление).
У кукурузы рецессивный ген «укороченные междоузлия» (b) находится в одной хромосоме с рецессивным геном «зачаточная метелка» (v). При проведении анализирующего скрещивания с растением, имеющим нормальные междоузлия и нормальную метелку, всё потомство было похоже на одного из родителей. При скрещивании полученных гибридов между собой в потомстве оказалось 75% растений с нормальными междоузлиями и нормальными метелками, а 25% растений с укороченными междоузлиями и зачаточной метелкой. Определите генотипы родителей и потомства в двух скрещиваниях. Составьте схему решения задачи. Объясните полученные результаты. Какой закон наследственности проявляется во втором случае?
Ответ
Если при анализирующем скрещивании всё потомство получилось одинаковым, значит анализируемый организм был доминантной гомозиготой (закон единообразия).
bv
bv
BV
BV
BV
bv
BV
bv
BV
BV
bv
BV
bv
bv
bv
норм.
норм.
норм.
норм.
норм.
норм.
укороч.
зачат.
Во втором скрещивании проявляется закон сцепленного наследования, поскольку у организма BV/bv образуется только два вида гамет BV и bv, а гаметы Bv и bV не образуются.
При скрещивании душистого горошка с яркой окраской цветов и усами с растением с бледной окраской цветков и без усов (гены сцеплены) в F1 все растения были с яркими цветками и усами. При скрещивании между собой гибридов F1 были получены растения: с яркими цветками и усами, бледными цветками и без усов. Составьте схему решения задачи. Определите генотипы родителей, потомства F1 и F2. Какие законы наследственности проявляются в данных скрещиваниях? Объясните появление двух фенотипических групп особей в F2.
Ответ
В F1 все потомство получилось одинаковым. Следовательно, скрещивали двух гомозигот, проявившиеся в F1 признаки являются доминантными.
А — яркие цветки, a — бледные цветки
B — усы, b — без усов.
AB
AB
ab
ab
AB
ab
яркие
усы
AB
ab
AB
ab
AB
AB
AB
ab
AB
ab
ab
ab
яркие цветки
усы
бледные цветки.
без усов
В первом скрещивании проявился закон единообразия, во втором – закон сцепления. Две (а не четыре) фенотипические группы появились из-за сцепления генов.
При скрещивании самок мух дрозофил с серым телом и нормальными крыльями (доминантные признаки) с самцами с черным телом и укороченными крыльями (рецессивные признаки) в потомстве были обнаружены не только особи с серым телом, нормальными крыльями и черным телом, укороченными крыльями, но и небольшое число особей с серым телом, укороченными крыльями и черным телом, нормальными крыльями. Определите генотипы родителей и потомства, если известно, что доминантные и рецессивные гены данных признаков попарно сцеплены. Составьте схему скрещивания. Объясните полученные результаты.
Ответ
А — серое тело, а — черное тело
B — нормальные крылья, b — укороченные крылья
AB
ab
ab
ab
нормальные
гаметы
рекомбинантные
гаметы
AB
ab
ab
ab
Ab
ab
aB
ab
серое
норм.
черное.
укороч.
серое
укороч.
черное
норм.
Небольшое количество особей с серым телом, укороченными крыльями и черным телом, нормальными крыльями объясняется тем, что они возникли из яйцеклеток, в которых произошла рекомбинация из-за кроссинговера.
При скрещивании растений кукурузы с гладкими окрашенными зернами с растением, дающим морщинистые неокрашенные семена, в первом поколении все растения давали гладкие окрашенные зерна. При анализирующем скрещивании гибридов из F1 в потомстве было четыре фенотипические группы: 1200 гладких окрашенных, 1215 морщинистых неокрашенных, 309 гладких неокрашенных, 315 морщинистых окрашенных. Составьте схему решения задачи. Определите генотипы родитетелй и потомства в двух скрещиваниях. Объясните формирование четырех фенотипических групп во втором скрещивании.
Ответ
Поскольку в первом поколении получилось единообразие (первый закон Менделя), следовательно, скрещитвали гомозигот, в F1 получилась дигетерозигота, несущая доминантные признаки.
А — гладкие зерна, а — морщинистые зерна.
B — окрашенные зерна, b — неокрашенные зерна.
Анализирующее скрещивание – это скрещивание с рецессивной гомозиготой. Поскольку во втором поколении получилось неравная численность фенотипических групп, следовательно, имело место сцепленное наследование. Те фенотпические группы, которые представлены в большом количестве, получены из нормальных гамет со сцепленными генами, а группы, представленные в малом количестве – из рекомбинантных гамет, сцепление в которых было нарушено из-за кроссинговера в мейозе.
AB
AB
ab
ab
AB
ab
гладкие
окрашен.
AB
ab
ab
нормальные гаметы
со сцеплением, много
рекомбинантные гаметы
с нарушенным
сцеплением, мало
AB
ab
ab
ab
Ab
ab
aB
ab
гладкие
окрашенные,
много (1200)
морщинист.
неокрашен.,
много (1215)
гладкие
неокрашен.,
мало (309)
морщинист.
окрашен.,
мало (315)
Формирование четырех фенотипических групп проихошло из-за кроссинговера, которые привел к частичному нарушению сцепления.
При скрещивании дигетерозиготного высокого растения томата с округлыми плодами и карликового (a) растения с грушевидными плодами (b) в потомстве получено расщепление по фенотипу: 12 растений высоких с округлыми плодами; 39 – высоких с грушевидными плодами; 40 – карликовых с округлыми плодами; 14 – карликовых с грушевидными плодами. Составьте схему скрещивания, определите генотипы потомства. Объясните формирование четырёх фенотипических групп.
Ответ
а – карликовое растение, А – высокое растение
b – грушевидные плоды, B – округлые плоды
Дигетерозиготное растение имеет генотип AaBb, карликовое растение с грушевидными плодами – aabb. Поскольку количество потомков получилось неравное (не 1:1:1:1), следовательно, происходит сцепление. Те фенотипические группы, которые представлены в большом количестве (39+40), получены из нормальных гамет со сцепленными генами, а группы, представленные в малом количестве (12+14) – из рекомбинантных гамет, сцепление в которых было нарушено из-за кроссинговера в мейозе. Признаки нормальных потомков «высокий грушевидный» и «карликовый округлый», следовательно, эти гены находятся в одной хромосоме, дигетерозиготный родитель Ab//aB.
Ab
aB
ab
ab
G норм.
G рекомб.
Гибридная мышь полученная от скрещивания линии мышей с извитой шерстью нормальной длины с линией имеющей прямую длинную шерсть, была скрещена с самцом, который имел длинную извитую шерсть. У мышей извитая, длинная шерсть зависит от рецессивных аутосомных генов(сцепления. Насл) 1) Какой процент потомков имеет генотип самки? 2) Сколько фенотипов от такого скрещивания? 3) Какой процент потомков имеет гетерозиг. Особей
Ответ:
снежного барана в расцветке шерсти, а бурундука — в густоте шерсти
Объяснение:
Цветки у растений семейства Бобовые одиночные или собраны в соцветие — кисть или головку. Цветок похож на кораблик или бабочку, поэтому второе название семейства — Мотыльковые. Венчик цветка бобовых состоит из 5 лепестков: верхний крупный — «флаг», или «парус», два боковых — «крылья», или «вёсла», а два внутренних срастаются по нижнему краю и образуют «лодочку». В «лодочке» заключены 10 тычинок и 1 пестик. У некоторых бобовых (горох, люцерна) нити 9 тычинок срастаются, а одна остаётся свободной. Формула цветка большинства бобовых: Ч5Л1+2+(2)Т(9)+1П1. Цветки опыляют насекомые, в основном пчёлы. У клевера лепестки срастаются в длинную трубку, и хоботки пчёл не достают до нектара. Поэтому клевер опыляют шмели, имеющие более длинный хоботок. У гороха, люпина происходит самоопыление.Плод у бобовых — боб. Семена в нём располагаются на двух створках и покрыты плотной кожурой, благодаря которой они сохраняют всхожесть в течение нескольких лет.Корневая система бобовых — стержневая. Большинство из них имеют на корнях клубеньки — результат жизнедеятельности клубеньковых бактерий, которые проникают в корень из почвы. Клубеньковые бактерии способны использовать азот воздуха и образовывать содержащие азот минеральные вещества, которыми питаются растения. Азот входит в состав белков, поэтому бобовые богаты белками. После отмирания корней бобовых растений почва обогащается азотом и становится более плодородной.Среди растений семейства Бобовые встречаются все жизненные формы: деревья (робиния, или белая акация, мимоза), кустарники (карагана, или жёлтая акация), многолетние травы (клевер, люпин), а также вьющиеся формы (горох, вика).
Лишайники подразделяются на
— накипные
— листоватые
— кустистые,
Не видно сфоткай еще
Тест ЕГЭ по биологии, линия заданий 28
3627. Длина хвоста у мышей контролируется геном, который в доминантном гомозиготном состоянии определяет развитие длинного хвоста, в гетерозиготном — укороченного хвоста, в гомозиготном рецессивном — мыши погибают на эмбриональной стадии развития.В первом скрещивании самки мыши с черной окраской тела, длинным хвостом и самца с черной окраской тела, длинным хвостом в потомстве получилось фенотипическое расщепление: особи с черной окраской тела, длинным хвостом и особи с коричневой окраской тела, длинным хвостом. Во втором скрещивании гомозиготной самки мыши с черной окраской тела, укороченным хвостом и гомозиготного самца с черной окраской тела, укороченным хвостом в потомстве получилось фенотипическое расщепление: одна часть особей с черной окраской тела, длинным хвостом и две части особей с черной окраской тела, укороченным хвостом. Составьте схемы скрещиваний, определите генотипы и фенотипы родительских особей и потомства в скрещиваниях. Поясните фенотипическое расщепление во втором скрещивании.
Показать подсказку1) Первое скрещивание
2) Генотипы и фенотипы потомства: 1 AABB, 2AaBB- черное тело, длинный хвост
1 aaBB — коричневое тело, длинный хвост
3) Второе скрещивание
4) Генотипы и фенотипы потомства 1 AABB — черное тело, длинный хвост
2 AABb — черное тело, укороченный хвост
3) Во втором скрещивании фенотипическое расщепление особей составит 1 : 2, так как особи с генотипом AAbb погибают на эмбриональной стадии
P.S. Нашли ошибку в задании? Пожалуйста, сообщите о вашей находке 😉
При обращении указывайте id этого вопроса — 3627.
японских ученых планируют создать гибриды человек-мышь. Вот как.
Вскоре в Японии могут вырасти несколько необычных эмбрионов: гибриды человек-мышь и человек-крыса, сообщают источники новостей.
Исследовательская группа в Японии получила 24 июля одобрение комитета при правительстве Японии на проведение эксперимента по внедрению человеческих стволовых клеток (клеток, которые могут вырасти почти в любую клетку) в эмбрионы животных.
Оказавшись внутри эмбриона, клетки человека, называемые индуцированными плюрипотентными стволовыми (iPS) клетками, могут прорасти в определенные органы.Если все пойдет хорошо, исследователи планируют в конечном итоге вырастить человеческие органы у других животных, например у свиней. Возможно, эти органы однажды можно будет использовать для трансплантации органов людям, говорят исследователи. [9 самых интересных трансплантатов]
«Я лично подумал, что это было очень интересно», что правительство Японии одобрило этот проект, — сказал Рональд Парчем, доцент кафедры нейробиологии в Медицинском колледже Бейлора в Хьюстоне, который не имеет отношения к новому проекту. исследовательская работа. «Он обладает огромным потенциалом, чтобы помочь многим людям, которые страдают от широкого спектра заболеваний или нуждаются в замене различных типов тканей или органов.»
Однако по мере продвижения этого исследования могут возникнуть научные и этические вопросы.
Как мы сюда попали
Япония попала в заголовки газет в марте, когда страна отменила запрет на выращивание человеческих клеток в эмбрионах животных после 14-го дня. существование эмбриона и трансплантация этих эмбрионов в матку суррогатного животного.Эта перемена имела большое значение для Хиромицу Накаучи, биолога стволовых клеток из Стэнфордского и Токийского университетов, который проводил исследования в этом направлении более чем десятилетие, сообщает журнал Nature.
Теперь, ожидая официального одобрения в следующем месяце со стороны Министерства образования, культуры, спорта, науки и технологий Японии, исследование Накаучи может быть первым, одобренным в соответствии с новыми руководящими принципами Японии, согласно Nature.
Если будет получено одобрение, сказал Накаучи, он планирует продвигаться вперед небольшими шагами, сначала запрограммировав эмбрионы мыши и крысы так, чтобы не росла поджелудочная железа. Затем Накаучи перенесет человеческие iPS-клетки в эти эмбрионы в надежде, что имплантированные клетки справятся с этой задачей, по сути вырастив «человеческую» поджелудочную железу в эмбрионах грызунов.[Настоящий или поддельный? 8 Bizarre Hybrid Animals]
После того, как эмбрионы разовьются и родятся полноценными крысами и мышами, исследователи планируют потратить до двух лет на наблюдение за малышами. Этот этап является ключевым, поскольку правительство наложило определенные нюансы на исследования. Например, если ученые обнаруживают человеческие клетки в более чем 30% головного мозга грызунов, ученые должны прекратить эксперимент. Это сделано для того, чтобы «очеловеченное» животное не появилось на свет, сообщает новостной сайт ScienceAlert.
Гуманизированная мышь?
Термин «гуманизация» расплывчат. Но, по сути, некоторые ученые и специалисты по этике обеспокоены тем, что, если слишком много человеческих клеток проникает в мозг мыши, то «мозг этой мыши может каким-то образом иметь изменение познания или умственных способностей», — сказал Парчем Live Science. «Мы на самом деле не знаем, что произойдет. Наши тренировки показывают, что очень маловероятно, что вы получите мышь с человеческими качествами… Вы можете обнаружить, что в мозгу больше складок или больше [определенного] типа нейротрансмиттера.«
Другими словами, маловероятно, что гибридная мышь будет иметь человеческое поведение. Скорее, мышь может иметь определенные молекулярные особенности, подобные человеческим, — сказал Парчем. [11 частей тела, выращенных в лаборатории]
Но этот сценарий — тоже маловероятно, — сказал Накаучи. В предыдущем эксперименте он поместил человеческие iPS-клетки в оплодотворенное овечье яйцо, а затем трансплантировал этот эмбрион овце в Стэнфордском университете. Пересаженные человеческие клетки не превратили эмбрион в странного человека. — сказал он.(Гибридный эмбрион не был доведен до срока; он был уничтожен через 28 дней развития.)
«Количество человеческих клеток, выросших в телах овец [было] чрезвычайно мало, примерно 1 на тысячу или 1 на десятки тысяч », — сказал Накаучи японскому новостному агентству Asahi Shimbun. «На этом уровне животное с человеческим лицом никогда не родится».
Его команда также планирует провести эксперимент с другими органами, включая человеческую печень и почки, сообщает The Asahi Shimbun.
Научные и этические вопросы
Метод Накаучи является обоснованным с научной точки зрения, поскольку он не подразумевает простую вставку клеток одного вида в эмбрион другого вида — что не всегда работает.И когда это происходит, конечный результат известен как химеризм, смесь клеток двух или более организмов.
«Каждый раз, когда вы берете один вид и смешиваете его с другим, вид-хозяин [тот, у которого есть эмбрион], как правило, чувствует себя лучше», — сказал Парчем. «Если вы возьмете крысиную клетку и поместите ее в бластоцисту мыши [ранний эмбрион], крысиные клетки окажутся в невыгодном положении. Вот почему в целом химеризм очень низкий».
Однако, когда у хозяина вырубается целый орган, например поджелудочная железа, у интродуцированных клеток другого вида появляется шанс.«Им не нужно конкурировать за создание поджелудочной железы», — сказал Парчем. «И затем эти другие виды клеток могут вносить значительную часть клеток, которые генерируют определенную ткань или орган. В противном случае это маловероятно».
Парчем отметил, что ученые экспериментировали с химеризмом на нечеловеческих животных, особенно на тех, которые тесно связаны друг с другом, таких как перепела и куры, в течение десятилетий, поскольку это помогает исследователям узнать о биологии развития. Но «наша способность создавать химеры из людей на самом деле очень мала», — сказал он.«Все данные говорят о том, что человеческие клетки очень плохо интегрируются в другие виды, на которые мы смотрели, такие как свиньи, мыши, крысы и овцы».
Эксперименты с химерами на человеке могли бы иметь больший успех, если бы другие животные были нечеловеческими приматами, которые более тесно связаны с людьми, чем другие лабораторные животные. Но Парчем сказал, что никогда не слышал о таком эксперименте, который, по его словам, «явно более чреват этическими проблемами», чем тестирование на мышах или овцах.
А пока ученые должны посмотреть, как продвигаются эксперименты Накаучи.Как сказал Накаучи The Asahi Shimbun: «Мы не ожидаем немедленного создания человеческих органов, но это позволяет нам продвигать наши исследования, основываясь на ноу-хау, которое мы приобрели к настоящему моменту».
В Соединенных Штатах были созданы гибриды человека и животного, но так и не удалось вывести их на свет, сообщает Nature. Более того, такие исследования в США должны финансироваться из частных источников, поскольку в 2015 году Национальные институты здравоохранения наложили мораторий на оплату любых таких исследований.
Первоначально опубликовано на Live Science .
,Номенклатура штаммов мышей
Большое количество штаммов GEMM ( G энетически E ngineered и M utant M ice) являются конгенными штаммами. Конгенные штаммы получают путем переноса мутации от одного генетического фона к конкретному инбредному штамму путем повторного обратного скрещивания. Ожидается, что конгенный штамм и инбредный партнер будут идентичны по всем локусам, за исключением перенесенного локуса и связанного сегмента хромосомы.Размер сегмента и возможность передачи аллелей на другие хромосомы зависят от числа поколений обратного скрещивания.
Штамм считается полностью конгенным после десяти поколений обратного скрещивания (N10). Однако штаммы, несущие мутации, подвергшиеся обратному скрещиванию с фоновым штаммом в течение не менее пяти, но менее десяти поколений, считаются зарождающимися конгенными штаммами и могут быть полезны в различных областях исследований.
Большинство названий штаммов для конгенных мышей, несущих спонтанные и целевые мутации, а также для нескольких штаммов, конгенных по локусам гистосовместимости, не соответствуют стандартной конгенной номенклатуре по историческим причинам.В ответ на обеспокоенность научного сообщества по поводу происхождения генетических мутаций и различий в фенотипах из-за эффектов генетического фона, Международный комитет по стандартизированной генетической номенклатуре для мышей и Лаборатория Джексона взяли на себя обязательство исправить эти несоответствия.
Начиная с 1 июня 2000 г. большое количество названий штаммов мышей JAX® было изменено, чтобы указать на штамм, являющийся источником мутации. Штаммы перечислены под их новыми названиями, при этом прежние названия обозначены как в базе данных JAX® Mice Database.Примеры этих изменений имени приведены ниже. Конгенная номенклатура принимается, когда штамм достигает пятого поколения обратного скрещивания (N5), хотя штамм не считается полностью конгенным до N10. Было принято решение не изменять номенклатуру некоторых штаммов, несущих несколько аллелей, происходящих из разного происхождения, либо из-за способа создания штамма, либо из-за того, что номенклатура вызовет дополнительную путаницу. Дополнительную информацию о происхождении трансгенов и генетических мутациях можно найти в базе данных мышей JAX®, выполнив поиск с использованием символа гена или номера запаса, представляющего интерес.
Номенклатура родственных штаммов
Конгенические штаммы обозначаются составным символом, состоящим из штамма-хозяина (обычно сокращенно), точки, штамма-донора (также обычно сокращенного), дефиса и выделенного курсивом символа дифференциального локуса или локусов и аллелей (ов) ( например, , B10.129P- h22 b ). Когда штамм-донор не является инбредным или сложным, используется символ «Cg», обозначающий конгенный. Конгенная номенклатура применяется как к зарождающимся, так и к полным конгеникам.Номер поколения указан в деталях деформации.
Генетический фон многих конгеников представляет собой смесь C57BL / 6J и подштамма 129 (обозначенного либо B6; 129, B6; 129P или B6; 129S; см. Пояснение в «Пересмотренной номенклатуре мышей штамма 129»). Однако происхождение некоторых конгенных штаммов неизвестно, происходит от более чем двух штаммов-предшественников или имеет генетический вклад из неизвестного или аутбредного источника. Фон таких конгеников часто обозначается как «ЗАПАС.«Раньше большинство спонтанных и индуцированных мутаций, перенесенных путем обратного скрещивания со смешанного фона (, например, , B6; 129 или STOCK) на инбредный фон, не описывались с помощью традиционной конгенной номенклатуры. Однако названия многих штаммов генетически модифицированных и мутантных мышей были пересмотрены, чтобы более четко указать на происхождение мутации (, например, , B6.129P2-, Apoe tm1Unc / J).
Лаборатория Джексона поставляет большое количество конгенных штаммов гистосовместимости.В некоторых случаях несколько линий происходят от одного и того же донорского штамма и различаются числом и / или буквой в скобках (, например , B10.129P- h21 b (10M) / SnJ и B10.129P- h56 b h57 b (21M) / Sn).
В 2000 г. большое количество названий штаммов мышей JAX® было изменено, чтобы указать на штамм происхождения мутации. Примеры изменений номенклатуры
Пример 1.
НАИМЕНОВАНИЕ ШТАМА | B6.129P2- Tcrb tm1Mom / J |
НОМЕР ЗАПАСА | 002118 |
ТИП | Конгеническая целенаправленная мутация |
КОНТРОЛЬ | C57BL / 6J 000664 |
ФОНОВАЯ ДЕФИКАЦИЯ | C57BL / 6J |
ДОНОРСКИЙ ШТАМ | 129P2 через линию E14TG2a ES клеток |
ПОКОЛЕНИЕ | N12F15 |
Примечание: Это название штамма не следует путать с названием мутации, сохраняющейся на смешанном генетическом фоне B6; 129P, где аббревиатуры штаммов в названии разделяются точкой с запятой, а не точкой (см. Пример 5).Мы включили дополнительную информацию (тип штамма, контрольную информацию, фоновые и донорские штаммы, а также номер поколения) в детали конгенного штамма как в нашей печатной литературе, так и на нашем веб-сайте, чтобы более четко обозначить генетический фон.
Пример 2.
НАИМЕНОВАНИЕ ШТАМА | B6Ei.Cg- Atp7a Mo-blo / J |
НОМЕР ЗАПАСА | 002044 |
ТИП | Конгеническая спонтанная мутация |
КОНТРОЛЬ | Дикий тип из колонии |
ФОНОВАЯ ДЕФИКАЦИЯ | C57BL / 6JEi |
ДОНОРСКИЙ ШТАМ | Приклад Oak Ridge |
ПОКОЛЕНИЕ | N69F1 |
Примечание: Cg (для конгенных) используется, когда имеется несколько штаммов-доноров или штамм-донор имеет смешанный генетический фон.
Пример 3.
НАИМЕНОВАНИЕ ШТАМА | BKS.Cg- Dock7 m + / + Lepr db / J |
НОМЕР ЗАПАСА | 000642 |
ТИП | Конгеническая спонтанная мутация |
КОНТРОЛЬ | C57BLKS / J 000662 |
ФОНОВАЯ ДЕФИКАЦИЯ | C57BLKS / J |
ДОНОРСКИЙ ШТАМ | Лепр дб , C57BLKS; Док7 м , DBA / J |
ПОКОЛЕНИЕ | N? F82 |
Примечание: В этом примере Cg используется, чтобы не предполагать, что обе мутации возникли на DBA / J, показывая, что туманный ( m ) маркер цвета шерсти и мутация диабета ( Lepr db ) являются сохраняется в отталкивании.
Пример 4.
НАИМЕНОВАНИЕ ШТАМА | C.129P2 (B6) — Il2 tm1Hor / J |
НОМЕР ЗАПАСА | 002229 |
ТИП | Конгеническая целенаправленная мутация |
КОНТРОЛЬ | BALB / cJ 000651; Дикий тип из колонии |
ФОНОВАЯ ДЕФИКАЦИЯ | BALB / c |
ДОНОРСКИЙ ШТАМ | B6; 129P- Il2 tm1Hor |
ПОКОЛЕНИЕ | N10F9 + |
Примечание: Дополнительный вкладывающий генетический материал может быть указан в скобках после донорского штамма.В этом примере целевая мутация была перенесена со смешанного фона B6; 129P на третий инбредный штамм. Геномная область, фланкирующая ген-мишень, является 129P2-подобной из-за происхождения линии ES-клеток, но неизвестное количество генома штамма может иметь происхождение C57BL / 6. Количество ДНК донорского штамма, как связанного, так и несвязанного с дифференциальным локусом, уменьшается с увеличением поколений обратного скрещивания.
Штамм с мутацией на смешанном генетическом фоне
Пример 5.
НАИМЕНОВАНИЕ ШТАМА | B6; 129P2- Tcrb TM1Mom / J |
НОМЕР ЗАПАСА | 002117 |
ТИП | Целенаправленная мутация |
КОНТРОЛЬ | B6129PF2 100903 |
Примечание: Это не конгенный, а скорее смесь C57BL / 6 и 129P2 (из линии ES-клеток) и, следовательно, разделяющие аллели этих двух штаммов.Запятая между сокращениями штаммов была заменена точкой с запятой для более четкого отличия от точки в соответствующей номенклатуре.
Штамм, номенклатура которого не изменилась, но несет аллели разного происхождения
Пример 6.
НАИМЕНОВАНИЕ ШТАМА | B6.Cg- Gpi1 a Thy1 a Igh a / J |
НОМЕР ЗАПАСА | 001317 |
ТИП | Негистосовместимость |
Примечание: Этот штамм был получен путем скрещивания, а не обратного скрещивания трех отдельных конгенных штаммов, несущих дифференциальные аллели, уже на генетическом фоне C57BL / 6J (B6.C- Igh a , B6.PL- Thy1 a и B6.CAST- Gpi1 ).
,Созданиемышей из ES-клеток в MIT
Обновлено в июле 2013 г.
На этой странице представлены:
- Краткое руководство по выбору типа линии ES-клеток для нацеливания
- Таблица, которая поможет вам увидеть, как использовать цвета шерсти при разведении химер на передачу по зародышевой линии
- Подробное описание каждого типа линии ES-клеток и полное объяснение специфического для клеточной линии процесса эффективного построения вашей новой колонии мыши.
Сводка
Существует три типа эмбриональных стволовых (ES) клеток мыши, которые обычно используются для нацеливания и генерации мышей в MIT: 129, C57BL / 6 и 129 / B6 F1. Каждый из них имеет уникальные характеристики, преимущества и недостатки, и процесс создания новой колонии мышей незначительно отличается в зависимости от типа используемой линии ES-клеток.
Процесс создания конструкции для нацеливания и нацеливания на клетки ES описан в Руководстве для начинающих по нацеливанию на мышь, Временной шкале нацеливания на гены и других документах на нашей странице методов.
После того, как вы правильно определили нацеленные ES-клетки, их вводят в бластоцель (открытую полость) бластоцист мышей возрастом 3,5 дня в помещении для инъекций в помещении для животных 68N.
Инъецированные эмбрионы переносятся в рога матки псевдобеременных самок-реципиентов в установленное время. Эмбрионы вынашиваются в течение 18 дней, и полученные детеныши представляют собой химеры, ткани которых развились как из ES-клеток, так и из клеток бластоцисты-реципиента. Эта смесь стартовых клеток видна на шерсти мыши, на которой видны пятна цвета шерсти эмбриона-хозяина и пятна введенного клона ES.
Процент окраски шерсти можно определить через 10 дней после рождения, а пол — по 3-недельному возрасту. Химерных детенышей обычно отлучают от груди в возрасте 3-4 недель, и их мать проверяют на патогены. Если отчет о патогенах чистый, химеры переносятся в вашу мышиную комнату в возрасте 6-7 недель для вашего размножения. Рекомендуется, чтобы у мышей с 50% или более высоким вкладом ES-клеток был помощник для тестирования передачи целевого аллеля зародышевой линией. Иногда заражение зародышевой линией передается от химеры до 35%.
Основные сведения, которые помогут вам выбрать, какой тип ES-клетки использовать:
- Если вы не заботитесь о штаммах для ваших мышей, я настоятельно рекомендую использовать гибридную линию 129 / B6 F1 под названием V6.5. Вы можете использовать ДНК C57BL / 6 BAC для создания вашей конструкции, клетки очень надежны, и вы можете напрямую генерировать мышей, полученных из 100% ES-клеток (пропуская химеры), путем инъекции целевых клеток в тетраплоидные бластоцисты.
- Создание конструкции, нацеленной на клетки C57BL / 6 ES, происходит быстро, потому что этот геном секвенирован, а ДНК ВАС очень легко получить.Однако клетки C57BL / 6 менее устойчивы, чем клетки 129 ES, а мыши C57BL / 6 менее фертильны и с большей вероятностью поедают своих детенышей. Итак, C57BL / 6 проще вначале, но может вызвать большее разочарование, если у вас есть химеры.
- 129 ES-клетки очень устойчивы и хорошо развиваются по зародышевой линии. Однако последовательность генома 129 неизвестна, а BAC труднее получить. Следовательно, молекулярная биология требует больше усилий, но как только вы получите конструкцию, получить хорошую химеру и построить свою колонию будет довольно просто.
Карманный справочник Авроры по химере
Подробные характеристики для каждого типа линии клеток ES
129 Фон
Нацеливание наES-клетки было впервые установлено в 129 клетках, поэтому большинство опубликованных целевых мышей были получены из 129 ES-клеточных линий. Однако последовательность генома 129 не завершена, и между известной последовательностью C57BL / 6 и последовательностью 129 могут быть большие различия, особенно в некодирующих областях.В настоящее время большинство исследователей, нацеленных на 129 ES-клетки, используют известную последовательность экзонов для ПЦР их локуса в управляемых фрагментах геномной (хвостовой) ДНК из источника 129 (не так просто, как кажется). Затем вы должны выполнить собственное секвенирование или переваривать кусочки, чтобы определить, где находятся сайты рестрикции для клонирования и южан, и убедиться, что в экзон не было внесено никаких мутаций. Некоторые примеры 129 ES-клеток включают J1 и R1, которые оказались очень надежными. Многие животные были созданы с использованием линии 129 ES, называемой D3, но эта клеточная линия со временем стала анеуплоидией, и многие лаборатории обнаружили, что у нее есть трисомия 8, которая продуцирует быстрорастущие красивые ES-клетки, но не вносит вклад в зародышевую линию химер.
ES-клетки, полученные от 129 мышей, несут гены, которые приводят к окраске шерсти черного агути (коричневый), шиншиллы (темно-серый) или белого цвета. Большинство из 129 линий ES-клеток, используемых в Массачусетском технологическом институте, придают цвет агути. Цвет шерсти агути в 129 ES-клетках является доминирующим по сравнению с черным цветом шерсти клеток C57BL / 6. Следовательно, 129 ES-клеток вводят в бластоцисту реципиента C57BL / 6. Полученная химера имеет пятна агути (коричневые) и пятна черного цвета. В дополнение к тому факту, что 129 клеток обладают хорошей устойчивостью, есть два фактора, которые способствуют тому факту, что нередко получать химеры, которые на 90% -100% агути.Во-первых, кажется, что клетки 129 могут расти быстрее, чем клетки C57B6 в развивающемся эмбрионе мыши. Во-вторых, пигмент агути представляет собой секретируемый белок, поэтому коричневый цвет шерсти может немного распространяться и покрывать области, которые на самом деле образованы черными клетками. Чтобы создать новую колонию мышей, воспользуйтесь преимуществом того факта, что агути доминирует над черным C57BL / 6, и скрещивайте химеры смеси 129 / B6 с мышами C57BL / 6. Потомство будет либо агути (коричневым), если 129 ES-клетки внесли свой вклад в зародышевую линию химеры, либо потомство будет черным, если клетки бластоцисты-реципиента C57BL / 6 внесли свой вклад в зародышевую линию.Затем необходимо генотипировать всех детенышей агути, чтобы выяснить, какие из них получили целевой аллель. (в большинстве случаев только один из двух аллелей был мутирован в ES-клетке, поэтому только 50% мышей агути наследуют мутированный аллель). Если критически важно поддерживать мутацию на чистом фоне 129, вы можете сначала скрестить свои химеры с мышами C57BL / 6, чтобы увидеть, какие химеры передают мутацию, а затем переместить эти успешные химеры в новые клетки для спаривания со 129 мышами. Теперь все потомство будет иметь окраску агути (потому что самец 129 дикого типа всегда будет передавать ген агути), поэтому все детеныши должны быть генотипированы.
C57BL / 6 Фон
Создание направленной конструкции для нацеливания на клетки C57BL / 6 ES относительно просто благодаря секвенированию генома мыши C57BL / 6 и недорогой и легкой доступности геномной ДНК от мыши C57BL / 6 в виде секвенированных, перекрывающихся векторов ВАС , Это особенно полезно, если вы хотите, чтобы ваша мутация / изменение происходила на чистом фоне C57BL / 6. Однако существует очень ограниченное количество клеточных линий C57BL / 6 ES (включая v26.2, Bruce4 и JM8), и они не так успешно вносят вклад в зародышевую линию химер.C57BL / 6 ES имеют тенденцию становиться анеуплоидными, и все клеточные линии, используемые в нашем учреждении, развивают популяцию клеток трисомии 8, которые растут быстрее, чем эуплоидные клетки, и подавляют культуру. Эти клетки производят хорошие химеры, но не развиваются по зародышевой линии. Кроме того, мыши C57BL / 6, как правило, имеют меньший помет, поедают своих детенышей и демонстрируют пониженную фертильность в более раннем возрасте по сравнению со 129 мышами. Даже с этими ограничениями некоторые исследователи действительно любят использовать клетки C57BL / 6 ES и опубликовали свои аргументы в пользу рекомендации:
E.Сеонг и др., «Нокаутировать в 129 или в C57BL / J: вот в чем вопрос», TRENDS in Genetics , Vol. 20, № 2, февраль 2004 г., стр. 59-62
Эти клетки ES будут производить мышей с черным окрасом шерсти. Для создания химер целевые клетки C57BL / 6 ES вводят в бластоцисту-реципиент Balb / c (белый цвет шерсти). Белые клетки Balb / c фактически содержат замаскированный пигмент агути, который раскрывается при контакте с черным пигментом. Таким образом, химеры, рожденные из этой смеси клеток, имеют участки черного и белого цвета с волосками агути по краям.Небольшие участки клеток из клеток C57BL / 6 ES будут просто появляться агути на белом халате. Чтобы создать новую колонию мышей, вы можете поддерживать свою мутацию на фоне C57BL / 6, используя при этом тот факт, что черный доминирует над белым / замаскированным агути Balb / c, и скрещивать свою смесь C57BL / 6-Balb / c. химеры мышей C57BL / 6. Потомство будет либо черным, если клетки C57BL / 6 ES внесли свой вклад в зародышевую линию химеры, либо потомство будет агути (коричневым), когда клетки из бластоцисты-реципиента Balb / c внесли свой вклад в зародышевую линию.Опять же, скрещивание Balb / c с C57BL / 6 демаскирует ген агути Balb / c, дав коричневых щенков, которые на этот раз вам не нужны. В этом спаривании все черные щенки должны быть генотипированы, чтобы узнать, какие из них получили целевой аллель. Опять же, большинство нацеленных на гены мутируют только в одном из двух аллелей в ES-клетке, поэтому только 50% черных мышей наследуют мутировавший аллель. Мыши с целевым аллелем могут быть скрещены друг с другом или с мышами C57BL / 6 дикого типа, и фон штамма останется чистым C57BL / 6.
129 / B6 F1 Гибридный фон
Самая распространенная гибридная линия 129 / B6 F1 — V6.5 от Jaensich Lab. Эти ES-клетки возникли в результате спаривания 129 x C57BL / 6, поэтому на них приходится 50% вклада каждого фона. Поэтому они могут быть нацелены с помощью легко доступной ДНК C57BL / 6, они чрезвычайно устойчивы и вносят большой вклад в зародышевую линию химер. Эти ES-клетки можно вводить в бластоцисты-реципиенты C57BL / 6 для образования химер, в бластоцисты-реципиенты Balb / c для образования химер, или они также могут быть введены в тетраплоидные мышиные эмбрионы для создания мышей, полностью полученных из ES-клеток.(См. Подробности ниже). Гибридные ES-клетки 129 / B6 F1 продуцируют мышей с оболочкой агути, поэтому гибридные ES-клетки, введенные в бластоцисту C57BL / 6, будут производить химеры агути и черного цвета, которые выглядят так же, как химеры, полученные при инъекции 129 ES-клеток в C57BL / 6. бластоцисты. Однако скрещивание химер, полученных из гибридных ES-клеток 129 / B6 F1, менее прямолинейно. Напомним, что ES-клетки состоят на 50% из 129 и на 50% из C57BL / 6, поэтому 50% сперматозоидов, которые развились из этих клеток, будут производить пигмент агути, а остальные 50% сперматозоидов, полученных из ES-клеток, будут производить только черный пигмент. ,Следовательно, химеры Hybrid / B6 должны быть скрещены с мышами C57BL / 6, и вы должны следить за пометами, в которых есть хотя бы одна мышь агути. Присутствие любого потомства агути означает, что ES-клетки вносили вклад в зародышевую линию химеры.
,уроков от тау-дефицитных мышей
- Журналы
- Публикуйте с нами
- Партнерские отношения с издателями
- О нас
- Блог
Международный журнал болезни Альцгеймера
+ Журнал Меню журнала Журнала DFF Журнал Обзор журнала для авторовОбзор журнала для авторов / 2012 / СтатьяСтатья РазделыНа этой странице
АннотацияИнтродукция.
Leave A Comment