Впр ру официальный сайт: ВПР СтатГрад официальный сайт, варианты, демоверсии для 4, 5, 11 класса

Образцы и описания проверочных работ для проведения ВПР в 2020 году

Образцы и описания проверочных работ для проведения ВПР в 2021 году

Методические рекомендации по проведению Всероссийских проверочных работ

Всероссийские проверочные работы (ВПР) – это комплексный проект в области оценки качества образования, направленный на развитие единого образовательного пространства в Российской Федерации, мониторинг введения Федеральных государственных образовательных стандартов (ФГОС), формирование единых ориентиров в оценке результатов обучения, единых стандартизированных подходов к оцениванию образовательных достижений обучающихся.

Указанные цели достигаются за счет проведения ВПР в единое время по единым комплектам заданий, а также за счет использования единых для всей страны критериев оценивания.

В 2019 году участие в ВПР для 4, 5, 6 классов было обязательным, для 7 и 11 классов – по решению школы.

План-график проведения ВПР 2019

Проект расписания ВПР на 2020 год

Приказ Рособрнадзора от 11.02.2021 №119 «О проведении Федеральной службой по надзору в сфере образования и науки мониторинга качества подготовки обучающихся общеобразовательных организаций в форме всероссийских проверочных работ в 2021 году» (с письмом от 12.02.2021 №14-15)

План-график проведения всероссийских проверочных работ в 2021 году

Порядок проведения ВПР в 2021 году

Письмо Рособрнадзора №14-22 от 25.02.2021 о проведении ВПР для обучающихся по образовательным программам СПО в 2021 году

Приказ Рособрнадзора от 27.12.2019 №1746 «О проведении Федеральной службой по надзору в сфере образования и науки мониторинга качества подготовки обучающихся общеобразовательных организаций в форме всероссийских проверочных работ в 2020 году»

Приказ Рособрнадзора от 07.02.2019 № 104 «О внесении изменений в график проведения Федеральной службой по надзору в сфере образования и науки мониторинга качества подготовки обучающихся общеобразовательных организаций в форме национальных исследований качества образования и всероссийских проверочных работ в 2019 году, утвержденный приказом Федеральной службы по надзору в сфере образования и науки от 29 января 2019 г. № 84 «О проведении Федеральной службой по надзору в сфере образования и науки мониторинга качества подготовки обучающихся общеобразовательных организаций в 2019 году»

Приказ Рособрнадзора от 29.01.2019 № 84 «О проведении мониторинга качества образования в 2019 году»

Письмо Минпросвещения России и Рособрнадзора от 25.01.2019 № 01-48/13-01 «О направлении примерного плана-графика всероссийских проверочных работ (ВПР) и национальных исследований качества образования (НИКО) в 2019 году»

ВПР 2019. Список образовательных организаций с признаками необъективных результатов

ВПР 2018. Список образовательных организаций с признаками необъективных результатов

Рекомендации по повышению объективности оценки образовательных результатов

 ________________________________________________________________________________

Вебинар по использованию банка оценочных средств для проведения ВПР ОО 26/11/2019

Вебинар по использованию банка оценочных средств для проведения ВПР специалистами, осуществляющими ФГККО 27/11/2019

ВПР

Особенности работы с ФИС ОКО

План-график проведения ВПР 2021

Образцы и описания проверочных работ для проведения ВПР в 2021 году

>>>>ОБ ИССЛЕДОВАНИИ<<<

Мероприятия по оценке качества образования в рамках национального проекта Всероссийские проверочные работы (ВПР) проводятся в общеобразовательных организациях всех субъектов Российской Федерации по инициативе Федеральной службы по надзору в сфере образования и науки (Рособрнадзор).

Главная идея проекта ВПР состоит в том, чтобы выработать единые подходы к оценке школьного образования. Важно не только фиксировать результаты учащихся, полученные в рамках итоговых экзаменов в 9-х и 11-х классах (ГИА-9 и ЕГЭ-11), но и промежуточные результаты процесса обучения и их динамику. Осуществлять такую промежуточную оценку возможно с помощью Всероссийских проверочных работ, проводимых по всем предметам и во всех классах школ страны.

Цель ВПР: Получение реальных данных о качестве и результатах обучения, насколько полно учащиеся осваивают знания и навыки, установленные федеральным государственным образовательным стандартом общего образования.

Всероссийские проверочные работы – это итоговые контрольные работы для обучающихся разных классов по отдельным предметам, которые проводятся по итогам учебного года с целью совершенствования образовательных программ, а также для индивидуальной работы с учащимися по устранению имеющихся пробелов в знаниях.

Проведение ВПР направлено на обеспечение единства образовательного пространства Российской Федерации и поддержки введения Федерального образовательного стандарта за счет предоставления образовательным организациям единых материалов и единых критериев оценивания учебных достижений.

>>>МЕТОДИЧЕСКИЕ МАТЕРИАЛЫ<<<

Полезные материалы

ВПР

Порядок проведения ВПР в 2020 году (с изменениями)

Методические рекомендации по проведению Всероссийских проверочных работ

План-график проведения ВПР 2021

Приказ о подготовке и проведению ВПР в 4-11 классах в 2021 г.

Образцы и описания проверочных работ для проведения ВПР в 2020 году

Приказ Федеральной службы по надзору в сфере образования и науки (Рособрнадзор) от 27.12.2019 г. № 1746 «О проведении Федеральной службой по надзору в сфере образования и науки мониторинга качества подготовки обучающихся общеобразовательных организаций в форме всероссийских проверочных работ в 2020 году»

Приказ Федеральной службы по надзору в сфере образования и науки (Рособрнадзор) от 17.03.2020 №313 «О внесении изменений в приказ Федеральной службы по надзору в сфере образования и науки от 27.12.19 №1746»

Приказ Федеральной службы по надзору в сфере образования и науки «О проведении всероссийских проверочных работ в 4-8, 10-11 классах в 2021 году»  

Пистмо Федеральной службы по надзору в сфере образования и науки   «О проведении Федеральной службой по надзору в сфере образования и науки мониторинга качества подготовки обучающихся образовательных организаций в форме всероссийских проверочных работ в 2021 году»

Официальный сайт ВПР 2020 – ФИКО, ФИПИ   https://vpr-ege.ru/vpr/540-raspisanie-vpr-2020

Образцы и описания проверочных работ для проведения ВПР в 2021 году   https://fioco.ru/obraztsi_i_opisaniya_vpr_2021

4 класс https://vpr-ege.ru/vpr/4-klass

5 класс https://vpr-ege.ru/vpr/5-klass

6 класс https://vpr-ege.ru/vpr/6-klass

7 класс https://vpr-ege.ru/vpr/7-klass

8 класс https://vpr-ege.ru/vpr/8-klass

10-11 класс https://vpr-ege.ru/vpr/11-klass?device=mobile

Новая информация

Федеральная служба по надзору в сфере образования и науки продлила сроки проведения всероссийских проверочных работ в 2020 году до 25 мая и разрешила школам самостоятельно определять их график. Соответствующий приказ был подписан временно исполняющим обязанности руководителя Рособрнадзора Анзором Музаевым.

• Приказ ДО Ярославской области «О внесении изменений о порядке и организации ВПР в Ярославской области в 2020 году».  

МБОУ СОШ №120 Нижний Новгород

Всероссийские проверочные работы  (ВПР)

Всероссийские проверочные работы (ВПР) проводятся ежегодно для 4-9,11 классов.

Цели проведения ВПР
ВПР проводятся в целях:
-осуществления мониторинга системы образования, в том числе мониторинга уровня подготовки обучающихся в соответствии с федеральными государственными образовательными стандартами, федеральным компонентом государственного
стандарта общего образования;
-совершенствования преподавания учебных предметов и повышения качества образования в образовательных организациях.

Участники ВПР
Участниками ВПР по каждому учебному предмету являются все обучающиеся соответствующих классов всех образовательных организаций Российской Федерации, реализующих программы начального общего, основного общего и/или среднего общего образования.

Приказ Министерства образования и науки Российской Федерации от 27.01.2017 № 69 «О проведении мониторинга качества образования»

Официальный сайт поддержки ВПР

Министерство просвещения РФ перенесло Всероссийские проверочные работы с конца 2019-2020 уч.года на  начало 2020-2021 учебного года: ВПР пройдут с 14 сентября по 12 октября 2020 года.

Все демоверсии ВПР 2020 для 4-11 классов

Приказ Рособрнадзора №821 от 05.08.2020: 821.pdf  «О проведении Всероссийских проверочных работ в 5-9 классах осенью 2020 года»

Демоверсии 2020 с сайта https://4vpr.ru/o/252-vse-demoversii-vpr-2020-dlya-4-11-klassov.html
4 класс   Математика | Русский | Окружающий мир
5 класс  Математика | История | Биология | Русский язык
6 класс  Математика | Обществознание | География | История | Биология | Русский язык
7 класс Математика | Обществознание | География | История | Иностранные языки | Биология | Русский язык | Физика
8 класс Обществознание | Математика | История | География | Биология | Русский язык | Химия | Физика

9 класс 
11 класс Иностранные языки | Физика | История | Химия | Биология | География

График проведения ВПР в, 5-х, 6-х, 7-х, 8-х классах общеобразовательных учреждений Ленинского района в 2020 году

Всероссийские проверочные работы в 2020-2021 учебном году пройдут в апреле-мае 2020 года для 4, 5, 6, 7, 8,9 и 11 классов и охватят практически все основные предметы школьной программы.

4 класс – русский язык, математика, окружающий мир 
5 класс – русский язык, математика, история, биология 
6 класс – русский язык, математика, география, обществознание, история, биология 
7 класс – русский язык, математика, география, биология, история, физика, география, обществознание, обществознание, физика, английский язык
8 класс – русский язык, математика, история, биология, география, обществознание, обществознание, биология, биология, история, английский язык 

9 класс – русский язык, математика, география, биология, история, физика, география, обществознание, обществознание, физика, английский язык
11 класс – география, физика, биология; история, иностранный язык, химия

Демонстрационные варианты ВПР на сайте ФИПИ 

Материалы для подготовки к ВПР

Демоверсии 2020 с сайта https://4vpr.ru/o/252-vse-demoversii-vpr-2020-dlya-4-11-klassov.html

4 класс   Математика | Русский | Окружающий мир
5 класс  Математика | История | Биология | Русский язык
6 класс  Математика | Обществознание | География | История | Биология | Русский язык
7 класс Математика | Обществознание | География | История | Иностранные языки | Биология | Русский язык | Физика
8 класс Обществознание | Математика | История | География | Биология | Русский язык | Химия | Физика

9 класс 
11 класс Иностранные языки | Физика | История | Химия | Биология | География

Открытый банк оценочных средств по русскому языку

В соответствии с Правилами осуществления мониторинга системы образования, утвержденными постановлением Правительства Российской Федерации от 5 августа 2013 г. N 662, а также в целях реализации Концепции преподавания русского языка и литературы в Российской Федерации, утвержденной распоряжением Правительства Российской Федерации от 9 апреля 2016 г. N 637-р, и Комплекса мер, направленных на систематическое обновление содержания общего образования на основе результатов мониторинговых исследований и с учетом современных достижений науки и технологий, изменений запросов учащихся и общества, ориентированности на применение знаний, умений и навыков в реальных жизненных условиях, утвержденного приказом Министерства образования и науки Российской Федерации от 15 декабря 2016 г. N 1598, в 2018 году будут проведены мониторинги по определенным предметам.

В соответствии с письмом Министерства образования, науки и молодежной политики  Нижегородской области  от 07.11.2018 № 316-23323/18 «Об организации информирования участников и организаторов оценочных процедур при подготовке обучающихся к ВПР  рекомендованы к ознакомлению следующие материалы:

— «Не волноваться!: как школам, ученикам и их родителям готовиться к ВПР»    (ссылка: https://ria.ru/sn_edu/20181011/1530355824.html ).

стенограмма «Расизм — и антирасизм — в Вермонте»

Эта стенограмма предназначена для шоу Vermont Edition, которое транслировалось в среду, 3 июня 2020 г.

Джейн Линдхольм: Это Vermont Edition. Я Джейн Линдхольм. Эта последняя неделя была чрезвычайно сложной для многих американцев, в том числе для многих жителей Вермонта, поскольку гнев, горе, истощение и другие сильные эмоции были направлены на протесты, происходящие по всей стране. Эти протесты были вызваны убийством Джорджа Флойда, 46-летнего чернокожего, который был отцом, бывшей звездой футбола средней школы, который несколько лет назад переехал из своего родного Техаса в Миннесоту в поисках работы.Смерть Джорджа Флойда вызвала этот раунд протестов, но это часть гораздо более широкой картины. И в этой итерации разговора о системном расизме в США больше внимания уделяется работе, которую необходимо проделать людям с белой идентификацией, чтобы разрушить эту систему. Сегодня в выпуске Вермонта мы поговорим о том, что происходит в стране, и о том, как расизм выглядит и ощущается в Вермонте. И мы рассмотрим, что делают белые вермонтеры для борьбы с расизмом и борьбы с расизмом.Ксусана Дэвис — исполнительный директор по расовому равенству в штате Вермонт. Она собирается присоединиться к нам вместе с другими гостями в течение часа. Ксусана, приятно видеть тебя в программе.

Сусана Дэвис: Спасибо. Здесь здорово.

Джейн Линдхольм: Вы знаете, на одной из пресс-конференций губернатора Скотта в начале этой недели, пресс-конференции в понедельник, вы говорили о том, что люди могут сделать прямо сейчас, чтобы бороться с расизмом, быть более антирасистскими, принимать меры. действие.И одна из вещей, которые вы сказали, было просто сделать что-нибудь, сделать что-нибудь. И вы говорите об этом специально с белыми вермонтерами. Почему белым вермонтерам нужно что-то делать сейчас?

Сусана Дэвис: Что ж, одно из самых больших заблуждений о равенстве, и я говорю не только о расовом равенстве, я имею в виду равенство для любой маргинальной группы, сообщества ЛГБТКИА плюс, людей с ограниченными возможностями, пола, пола, пола предпочтения, гендерная идентичность, социально-экономическое неравенство, любой вид равенства или справедливости.Одно из самых больших заблуждений, которые делают доминирующие члены группы, заключается в том, что это не влияет на них. Мы часто слышим, как многие мужчины думают, что права женщин на них не влияют. Мы думаем, что люди, которые не живут с ограниченными возможностями, не думают, что права с ограниченными возможностями влияют на них. Гетеросексуальные люди часто думают, что проблемы сообщества ЛГБТКИА плюс на них не влияют. И это так неправда. Дело в том, что справедливость приносит коллективную выгоду, а несправедливость — коллективный вред. И поэтому одна из вещей, которую я всегда, всегда призываю помнить белых вермонтеров, — это расовое равенство, вы можете не увидеть столько цветных вермонтеров, сколько мы надеемся, в конечном итоге мы увидим в штате.Но это, во-первых, не означает, что нас здесь нет. И, во-вторых, это не значит, что это не влияет на вас. Один пример, который я хотел бы привести, заключается в том, что в 2015 году, если бы в штате Вермонт было равенство в заработной плате между расовыми группами, то есть, если бы люди получали одинаковую или аналогичную заработную плату за одинаковую работу между этническими группами, ВВП нашего штата был бы были точки на два миллиарда с B долларов выше. Все в штате выигрывают от более крупной и крепкой экономики. Это один из многих способов увидеть несправедливость.Расовое неравенство отрицательно сказывается на каждом члене государства. И последнее, что я бы сказал, вы знаете, еще одна причина, по которой для белых вермонтеров действительно важно делать что-то конкретное, заключается в том, что, если бы покончили с покорением людей, это было бы к настоящему времени. Тот факт, что определенные люди обладают большей властью и привилегиями в нашем обществе, зависит от этих людей, которые будут обладать этой властью и привилегиями таким образом, чтобы устранить неравенство.

Джейн Линдхольм: Знаете, интересно услышать, как вы сначала говорите об идее, что справедливость приносит пользу всем, вроде попытки поразить людей идеей, что вы выиграете, если у всех будут честные правила игры.Но этого не должно быть, правда? Это не должно основываться на идее, что я лично получу выгоду, если другие люди смогут преуспеть и не столкнуться с расизмом, сексизмом или любыми другими измами, которые, как вы знаете, что вы, что вы внесены в это. Не должно быть, чтобы кто-то видел выгоду в том, чтобы убедиться в справедливости других людей.

Сусана Дэвис: Верно. На самом деле не должно быть. Мы должны заботиться о справедливости ради того, чтобы поступать правильно.Но для тех, кого не убеждают моральные доводы. Также необходимо сделать экономическое обоснование. И это то, чего мы просто не можем отрицать.

Джейн Линдхольм: Когда вы добавляете пересечение, что есть так много людей, которым приходится перепрыгивать через дополнительные препятствия в зависимости от их пола, из-за того, что они имеют другой пол, чем тот, который им был назначен при рождении или на основании которого, ну знаете, их расы или в зависимости от их способностей. Вы знаете, иногда из-за такого рода пересечений теряется то внимание, которое мы сейчас уделяем очень конкретным страданиям черных американцев в этой стране? Потому что можно сказать, что я женщина.Так что у меня тоже, знаете ли, были трудности или, знаете, я странный. Я тоже маргинальный человек, и это как бы распространяет это представление о том, что происходит прямо сейчас, в разговоре о том, как чернокожие американцы страдали и с ними обращались уже более пары сотен лет.

Ксусана Дэвис: Иногда мы действительно слышим людей из разных маргинальных групп, которые занимаются подобным образом а что насчет изма? И я думаю, что это тактика, которую доминирующие члены группы часто используют для разделения людей.Хорошо, говоря: ну, вы знаете, ваша борьба отличается от борьбы этой другой маргинальной группы, но мы расставим приоритеты для ваших проблем, и тогда вы можете забыть о поддержке их проблем. Это определенно способ разделения людей. Но я думаю, что гораздо чаще я вижу, как эти разные маргинализированные и исторически угнетенные группы объединяются и действительно поддерживают работу друг друга. Приведу один пример. Я получил очень большую поддержку от различных организаций штата, которые занимаются проблемами женщин, которые сказали: слушайте, мы знаем, что, в частности, цветные женщины в Вермонте дважды сталкивались с дискриминацией на нескольких этапах своего пути.Итак, наша цель совпадает с вашей, и мы хотим помочь. Так что я думаю, что чаще всего мы видим группы, признающие взаимосвязанность и желающие помочь друг другу в делах.

Джейн Линдхольм: Многие родители и преподаватели пытаются подумать о том, как говорить с детьми о расизме и антирасизме и о том, как может или должна выглядеть учебная программа, учитывающая как историю, так и текущие события в контексте рас и личность. Итак, давайте сейчас немного поговорим об этом.К нам присоединилась Ксусана Дэвис, а теперь и Эрин Магуайр, директор по вопросам справедливости, разнообразия и инклюзивности в школьном округе Эссекс-Вестфорд. Привет, Эрин. Приятно говорить с тобой.

Эрин Магуайр: Привет, Джейн. Приятно быть здесь. Спасибо, что пригласили меня.

Джейн Линдхольм: И Кристи Нольд, учительница обществознания в шестом классе средней школы Фредерика Х. Таттла в Южном Берлингтоне. Кристи, спасибо, что приняли участие в программе.

Кристи Нольд: Большое спасибо.Я очень рад быть частью этого состава.

Джейн Линдхольм: Эрин, не могли бы вы немного рассказать о том, что вы делаете в своем районе и в своей жизни, чтобы обратиться к этому как к способу общения с молодежью и, в частности, делать это в школьной обстановке, а не только для родителей, чтобы поговорить со своими детьми, а для школ, чтобы говорить о расе, расизме и расовом равенстве? Что ты делаешь по этому поводу?

Эрин Магуайр: Конечно. Спасибо за предоставленную возможность.Я думаю, что, безусловно, важно признать, что школы — это микрокосм общества, и мы обязаны обучать борьбе с расизмом так же, как мы должны учить борьбе с запугиванием и против многих видов вредного поведения, которое может нанести вред другим людям. Наше внимание было сосредоточено на неявной предвзятости и рассмотрении стереотипов, и мы только находимся в начальной стадии этой работы. Мы также сосредоточились на обеспечении того, чтобы все культуры имели равную ценность, и начали говорить о том, что это значит для взглядов, через которые мы обучаем, линз, через которые мы обучаем.Итак, когда вы думаете о евроцентрическом или западном доминирующем объективе и о том, как мы преподаем истории, вы можете представить себе, как думать о колонизации Америки можно было бы совсем по-другому, например, если бы это преподавалось через призму коренных американцев. И поэтому мы действительно начинаем глубоко задумываться о языке, который мы используем, о наших разговорах. А еще я хотел бы добавить, что мы работаем над тем, чтобы у учителей было понимание того, что они помогают, и обучение, необходимое им, чтобы иметь возможность вести такие беседы.Белым людям иногда трудно говорить об этом. Я белый, этого пола, работоспособен. Мне повезло. Все это правда обо мне. И я смогу осознать это, сесть с этим, понять преимущества, которые я получаю благодаря этому, и то, как это влияет на мои разговоры и мой язык как преподавателя в Вермонте, связанного с инструктажем по вопросам борьбы с расизмом в наших школах.

Джейн Линдхольм: Кристи Нольд, когда вы говорите об этих вещах со студентами и другими профессионалами в своей области, есть ли беспокойство по поводу того, как решить эту проблему в школе, чтобы родители не беспокоились о том, чему учат их детей? Я имею в виду, идет ли сюда та родительская тема, которая так часто встречается в разговорах о школьной программе? И как вы с этим справитесь?

Кристи Нольд: Совершенно верно.Нет никаких сомнений в том, что участие в антирасистской работе, особенно если вы ведете ее честно, вызовет много чувств, особенно среди белых. И есть ученые, писавшие гораздо красноречивее, чем я могу говорить. Итак, размышляя о «Хрупкости белого человека» Робина ДиАнджело, думая о том, как Кэрол Андерсон говорит о белой ярости, размышляя об идее белой эмоциональности, все эти различные способы реагирования возникают при столкновении с системой антирасизма, потому что она неуместна. , на самом деле работа направлена ​​на демонтаж.Это не просто попытки реформировать систему, которая была сломана, это действительно говорит о том, что эта система в самом ее основании никогда не предназначалась и не создавалась для студентов, которым она служит сегодня. И вместо того, чтобы просто реформировать эту систему, нам действительно нужно деконструировать ее, разобрать и по-другому подумать о том, как мы ориентируем нашу молодежь. И поэтому я бы сказал, что это многое поднимает для людей и людей, которые впервые вступают в этот разговор. Я думаю, что есть целый язык разговора, за которым может быть трудно следить.И поэтому я надеюсь, что, как преподаватели, мы сможем создать некоторые из них на пандусах для людей, не делая того, что Пол Горски называет шаганием к привилегиям, что на самом деле движется со скоростью самого медленного человека в комнате, потому что нам нужно двигаться гораздо быстрее. срочность. На карту поставлены жизни.

Джейн Линдхольм: Ты можешь рассказать о себе, Кристи? Вы были на одном из протестов в минувшие выходные, на митинге в Берлингтоне, со своими учениками. И, как вы знаете, одна из вещей, которые вы обсуждаете, — это то, как ваши цветные ученики выражают вам то, что они думают о школе как о безопасном или небезопасном месте, основанном на расизме.Не могли бы вы немного рассказать о том, что вам говорят?

Кристи Нольд: Да, конечно. Для меня невероятно большая честь общаться с такими замечательными молодыми людьми и молодыми лидерами. Я думаю, что то, что я услышал в субботу из микрофона, было очень ясно, это были молодые студенты со всего штата, которые рассказывали о своем опыте в школах. И это то, что я слышу от своих учеников ежедневно. Есть замечательный ученый, Келли Уикхэм Херст, которая писала в начале COVID-19, желая нарушить эту идею о месте травмы для многих преподавателей.О травме говорят так, как будто она всегда находится дома для молодежи, а школа — как безопасное место. Келли утверждает, что многие чернокожие ученики на самом деле процветают прямо сейчас, потому что они находятся вне зоны травмы, которая может стать нашей школой. Итак, для скольких наших черных и коричневых учеников обучение на дому может на самом деле быть местом обучения, основанного на любви, которое они не испытывают ежедневно в нашей школе? Вчера мне выпала невероятная возможность посидеть со своей ученицей Джулией и ее мамой Эмили Бернард.И одна из вещей, которые я слышала от Джулии, заключалась в том, что мне нужно, чтобы белые люди говорили об этом. Мне нужно, чтобы они заменили мои слова, потому что они слышны по-разному. И тот факт, что ученик восьмого класса настолько глубоко понимает критическую теорию расы и анализ, что может сказать, что мне нужны белые люди, чтобы высказаться и внести свой голос в этот разговор. И тот факт, что это правда, тот факт, что мое высказывание приземлится не так, как Джулия, у которой есть жизненный и воплощенный опыт этого, — это то, с чем я все время считаю.Я действительно могу думать об этой работе. Я могу это осмыслить. Я знаю, что по моему белому телу у меня никогда не будет того же опыта, что и у моих черных, коричневых и коренных учеников. Так что это значит? И как мне использовать свое белое тело, чтобы еще больше усилить слова, которые они говорят, и выполнить работу, которая должна выполняться в наших школах?

Джейн Линдхольм: Ксусана Дэвис, у Джулии также есть по крайней мере один родитель, который пишет об этом, думает об этом и говорит об этом и, следовательно, также предположительно разговаривает со своими детьми.Как вы думаете, родители разного происхождения, но особенно белые родители, которые, возможно, раньше не говорили о расе, расизме и привилегиях белых, как, по вашему мнению, они должны разговаривать со своими детьми прямо сейчас?

Сусана Дэвис: Возможно, первое, что я вам скажу, я не имею хорошего образования в раннем возрасте, я не специалист в области образования. Так что я сохраню большую часть этого, чтобы эксперты были на связи. Но, пожалуй, первое, что я скажу, дети похожи на губки.Мы все знаем, что они улавливают то, что мы говорим, и то, как мы их говорим, если мы относимся к разговорам о расе как к табу, а если мы относимся к теме расы как к табу, дети выбирают на этом, и они усвоят наш дискомфорт и превратят его в свой дискомфорт. Поэтому особенно важно, чтобы белые люди и белые родители чувствовали себя комфортно, говоря о расе, потому что ваши дети понимают, как вы к ней относитесь. Еще я бы сказал, что точно так же, как вам нужна соответствующая возрасту одежда и соответствующие возрасту средства массовой информации, вы также хотите поговорить со своими детьми о серьезных социальных проблемах в соответствии с их возрастом.И мне напомнили об одном конкретном руководстве, которое я нашел очень полезным, под названием «Вне золотого правила». Это написано Даной Уильямс. И это руководство для родителей с разбивкой по возрастным группам, чтобы помочь родителям понять, каковы различные способы и перспективы, с помощью которых они могут вовлечь своих детей в обсуждение вопросов справедливости.

Джейн Линдхольм: Мы получили записку от слушателя, который говорит, как педагог, я рад видеть много образовательных экспертиз на этом шоу.Я хотел бы услышать о некоторых конкретных стратегиях по обеспечению расового равенства в наших школах и о том, как это будет иметь преимущества для других форм равенства, а также других школьных результатов, которые нас волнуют. Эрин Магуайр, не могли бы вы ответить на этот вопрос?

Эрин Магуайр: Знаете, я думаю, что очень важно искать ресурсы, которые помогут преподавателям в этом. Я думаю о бесчисленном множестве книг и рассказов, которыми можно поделиться с детьми, которые ценят разнообразие в их контексте.А также, вы знаете, что идея о том, что никогда не рано говорить с детьми о расе и способности даже младенцы смотреть на разные лица, которые не обязательно соответствуют расе их опекунов и детей в возрасте от пяти до пяти лет и старше. способность выражать расовые предрассудки и способы их объяснения, понимания и высказывания против них. Поэтому я считаю, что подготовка учителей важна. И у нас сегодня нет времени, чтобы углубляться в длинный список.Но я думаю, что важно, чтобы все школьные округа в наших штатах разработали исчерпывающий список конкретных материалов и тренингов для наших педагогов, а также для наших родителей. Я думаю, что комментарии о поддержке белых родителей, которые могут не знать, как говорить со своими детьми о расе, действительно важны. Так что полностью согласен с вопросом. Конкретные ресурсы критически важны, они должны быть обеспечены и доступны. И я также считаю, что очень важно дать людям возможность узнать друг друга в своих различиях.Мы хотим убедиться, что наши люди, которые оказались в маргинальном положении, независимо от того, говорим ли мы о расе или инвалидности, имели возможность быть услышанными, выслушанными и поверившими в контексте образовательной работы и того, над чем мы не работаем. на них, что связано с нашей потребностью, а также с потребностями белых людей в знании и понимании нашей роли. Полезно услышать об этом опыте и пройти обучение, которое дает доступ к пониманию того, как маргинализация проявлялась в истории и для отдельных людей.

Джейн Линдхольм: Ну, и Эрин, вы также пытались заставить законодательный орган принять обновленные стандарты исследований этнического и социального равенства для школ, верно?

Эрин Магуайр: Да. Это была работа, которая проводилась по всему штату многими людьми и действительно поддерживала этот благодарный и признательный призыв к законодательным органам изучить расизм и социальную справедливость, как с точки зрения образования, так и с некоторыми из работ, которые администрация губернатора сделала, чтобы выявить необходимость в Вермонте.Да.

Джейн Линдхольм: Вы знаете, есть еще много всего, о чем можно поговорить о расе, истории и школьной программе. Так что это просто вкус. Но Эрин и Кристи, я хочу поблагодарить вас обоих за то, что вы обратили на это наше внимание и заставили нас задуматься об этом в этом шоу. Спасибо вам обоим за участие в программе.

Эрин Магуайр: Большое спасибо.

Кристи Нолд: Ага. Спасибо, что пригласили меня.

Джейн Линдхольм: Это Эрин Магуайр, директор по вопросам справедливости, разнообразия и инклюзивности школьного округа Эссекс-Вестфорд.И Кристи Нольд, учительница обществознания в шестом классе средней школы Фредерика Х. Таттла в Южном Берлингтоне. Пойдем к Нэнси, которая звонит из Патни. Привет, Нэнси. Какой у вас опыт?

Абонент, Нэнси: Ага. О, я владелец всех книг в центре Брэттлборо. И я просто хотел сказать, что невероятное количество людей приходило, покупало и выражало интерес к разнообразию книг, особенно для людей о том, как бороться с расизмом в нашей культуре.И мы продаем вещи для людей всех возрастов. И некоторые из книг, на которые люди действительно прыгают, — это как быть антирасистом и книга под названием «Я и превосходство белых». И еще один — «Штамп с самого начала». И было множество людей, покупающих вещи для детей. И мы продаем дворовые вывески Black Lives Matter, хотя их сейчас нет и мы ждем большего. Я просто хотел, чтобы люди знали, что, по крайней мере, в районе Брэттлборо многие, многие и многие люди занимаются самообразованием, а также наклеивают наклейки на бамперы на свои машины, носят футболки, делают, понимаете, действительно пытаются высказаться и убедитесь, что люди понимают, что это время, когда как белые, так и цветные люди должны действовать и вносить изменения.И мы получаем их тонны, или по телефону, или по электронной почте. Так что я просто хочу сказать, что в этом смысле горжусь своим сообществом.

Джейн Линдхольм: Ну, хорошо. Я рада это слышать, Нэнси. А если вы хотите перейти на vpr.org, щелкните сегодняшнее издание Vermont Edition. Вы можете поделиться списком книг, которые покупают люди, и, возможно, его смогут увидеть другие. Дениз написала, чтобы сказать: «Теперь я понимаю, что когда мы, белые люди, заявляем о материи черных жизней, это должно происходить из повседневной практики, ежедневной интеграции нового мышления.Мы, белые, что-то можем сделать. Мы можем избегать эгоцентрического, белого, привилегированного подхода к исправлению положения. Черные люди умеют позаботиться о себе. Черные знают, что для них лучше. И Эмили пишет в Твиттере, что неудобно быть белым и смотреть в лицо нашему наследию, но единственный способ изменить его — это открыться и слушать, читать, изучать и работать для перемен. Будьте антирасистами. Это должно быть у вас в голове, и знайте, что Вермонт ничем не отличается. У нас меньше чернокожих граждан, но это не значит, что мы не расисты и не привержены белому превосходству.А теперь давайте перейдем к Патрику, который звонит из Берлингтона. Привет, Патрик. Как твои дела?

Абонент, Патрик: Хорошо, спасибо. Спасибо, что ответили на мой звонок. Так что только об образовании. Приведу конкретный пример. В наших начальных и средних школах их куча. Он очень разнообразен, намного разнообразнее, чем был в 90-е годы. Но эти студенты не видят себя представленными в административном или преподавательском составе. И поэтому нам нужны образцы для подражания в наших школах, в нашей образовательной системе.Мы видели риторику. Мы слышали об этом классе годами, годами и годами. И это шаг вперед, осознание. Но нам нужно дойти до этой стадии внедрения, когда мы видим, как нанимают цветных людей, причем не только на должности среднего или более низкого уровня, но и на должности высшего уровня. Поэтому важно двигать циферблат. Я много работал над повышением осведомленности в сфере образования здесь, в Вермонте. Не так давно у меня был Бенджамин Крамп, который сейчас представляет пол здесь, в Вермонте, говорил о расизме в нашей системе уголовного правосудия.Анита Хилл здесь дважды говорила о гендерном неравенстве, гендерных проблемах, расе, классе и поле. Итак, мы прошли долгий путь, и нам еще предстоит пройти долгий путь. Я также собираюсь сказать, что в самом начале девяностых я жил во время Марша солидарности Родни Кинга, где с того времени по сегодняшний день в центре Берлингтона собралось почти 2000 человек. Немногое изменилось.

Джейн Линдхольм: Патрик, я собираюсь оставить это там, потому что я думаю, что это важная вещь. Вы работаете со своим организатором сообщества, вы приводите спикеров, но вы также говорите, что мало что изменилось.Итак, настал момент подумать о том, что может измениться для тех, кто хочет видеть перемены. Что это такое? Как ты этого добиваешься? Ксусана Дэвис остается с нами за то, что говорит о расизме и антирасизме в Вермонте и слышит от многих из вас, у кого тоже есть мысли, которыми можно поделиться. Кэти из Роялтона говорит: «Мне почти 62 года, и я белый. Я переехал в Вермонт в 1981 году. Я почему-то думал, что жители Вермонта неуязвимы для расизма. Как мы могли быть расистами, когда мы такие белые? Около 15 лет назад я посетил церковный семинар по расизму, который открылся фильмами о реальных событиях в Вермонте, таких как скрытые камеры, показывающие Vermonters в действии, домовладельца, который корчился при встрече с чернокожим арендатором, собеседование с приложением, которое выглядит потрясающе.Но когда появляется черный собеседник, ему никогда не говорят, почему он не получает работу. Этот фильм заслужил доверие не только потому, что он исходил из моей церкви, но я понял, что сам видел то же самое. Это заставило меня открыть глаза, по крайней мере, некоторые. Я все еще пытаюсь открыть глаза. Я очень хочу, чтобы расовая справедливость оставалась главной проблемой сейчас, потому что масштабы ее воздействия огромны и разрушительны. И Пег написала, что вы говорите, сделайте что-нибудь, как 78-летняя белая женщина, привязанная к дому. Что я могу сделать? Ксусана Дэвис, что может сделать такой человек, как Пег, что должен сделать такой человек, как Пег?

Сусана Дэвис: Первое, что могут сделать Пегс или кто-то вроде Пег, она уже сделала, а именно задать вопрос, чтобы продемонстрировать, что это проблема, заслуживающая внимания.И я мог бы просмотреть весь список стирки. Я работаю над тем, чтобы опубликовать на государственных веб-сайтах информацию о способах участия. Это немного длинновато. Итак, и я надеюсь, что смогу сделать это на следующий день или два. Но я просто расскажу о паре действительно быстрых вещей, которые люди могут сделать. И важно то, что вы не просто делаете символические вещи, которые не двигают стрелку. Я имею в виду, что они важны для символических жестов, потому что они демонстрируют солидарность и дают людям понять, что вы стоите с ними и стоите за справедливость.Однако мы занимаемся этой работой так долго, и мало что изменилось в том, что действительно важно, так это то, что мы делаем вещи, которые могут сдвинуть с мертвой точки, и вам не обязательно иметь ученую степень и полномочия. На самом деле тебе даже не нужно выходить из дома. Итак, вот несколько вещей, которые мы можем сделать. Узнайте в местных правоохранительных органах, правоохранительных органах на уровне округа или штата, чтобы узнать, оснащают ли они своих офицеров нательными камерами и видеорегистраторами, которые, как было продемонстрировано, помогают обеспечивать ответственность правоохранительных органов за их поведение.И он также защищает полицейских, документируя инциденты. Если вы не можете найти эту информацию или если вы обнаружите, что у них нет нательных фотоаппаратов, напишите своим местным представителям, напишите начальникам, шерифам и тем, кто возглавляет правоохранительные органы, чтобы отстаивать это. . Попросите друга сделать то же самое и умножить свой голос. Вы можете узнать, каких политик в области обучения и деэскалации придерживаются местные правоохранительные органы, правоохранительные органы округа и штата.Если у них нет правил, напишите своим представителям и отстаивайте их. Полиция штата Вермонт добилась действительно больших успехов в своей справедливой и беспристрастной политике, и предстоит еще много работы. Я ни на секунду не претендую на то, что VSP обязательно все выяснил, но я думаю, что они действительно проделали большую перспективную работу по этой теме. И они являются отличной моделью для других агентств по всему штату, которые могут подумать о таких вещах, как тюремное заключение и обязательные минимумы, быть в курсе законопроектов, которые сегодня проходят через законодательный орган.Чаще, чем когда-либо, законодатели наших штатов проводят встречи через цифровые платформы. Так что вы можете действительно слушать, что говорится на слушаниях, если вы обнаружите, что проблема может иметь негативные расовые последствия. Воспользуйтесь возможностью, чтобы дать показания или связаться с вашим представителем или членом комитета и высказать свое мнение. Вы можете часто посещать или не посещать предприятия, которые придерживаются определенных практик и правил социальной справедливости. Например, какие компании рекламируют на веб-сайтах, пропагандирующих ненависть.Правильно. Вы не поверите, но такие компании, как Whole Foods, размещают рекламу на сайтах СМИ, которые отмечены как СМИ сторонников превосходства белой расы. То есть они финансируют эти сайты. Вы покупаете у компаний, которые используют тюремный труд? Вы покупаете у компаний или живете в городе, который вложен в трубопровод доступа Дакоты? Вы знаете, вы поддерживаете предприятия, принадлежащие меньшинствам? Итак, это лишь некоторые из очень, очень многих вещей, которые люди могут сделать, чтобы принять участие.

Джейн Линдхольм: Ксусана упомянула полицию штата Вермонт, но, конечно, охрана правопорядка является большой проблемой, когда дело доходит до гонки в Вермонте и других местах, как и тюремная реформа.Иша Уильямс пишет: «Я живу в Вермонте. Ни одна страна не держит в тюрьмах такой высокий процент людей, как США. Рейтинг Европы — треть нашего. Тюремная система США расистская. Это согласно книге Мишель Александер «Новый Джим Кроу». Иша пишет, что тюремная система Вермонта — одна из самых расистских среди штатов с рейтингом 50 центов. Вермонт отправляет заключенных в частную тюрьму в Миссисипи. Законодательному собранию штата Вермонт необходимо повысить налоги для богатых людей и использовать деньги в программах, которые сработали в Европе, для сокращения количества людей в тюрьмах.Приведем сейчас еще двух гостей. Табита Мур — основатель и президент NAACP области Ратленд. Табита, приятно с тобой поговорить.

Табита Мур: Спасибо, что пригласили меня.

Джейн Линдхольм: Марк Хьюз является соучредителем и исполнительным директором «Справедливости для всех», общественной организации, работающей в направлении расовой справедливости в системе уголовного правосудия Вермонта. Он также является координатором по образованию Альянса расовой справедливости Вермонта и членом полицейской комиссии Берлингтона, которая рассматривает жалобы граждан, дисциплину офицеров и кадровые вопросы городского полицейского управления.Марк, я рад видеть тебя сегодня с нами.

Марк Хьюз: Рад быть здесь, Джейн. Спасибо, что пригласили меня.

Джейн Линдхольм: Не могли бы вы рассказать о том, что написал Иеша, чтобы рассказать о тюремной системе Вермонта? Иеша говорит, что это расист.

Марк Хьюз: Да, он большой, Джейн. Это большая, потому что чья тюремная система не является расистской? Вся система. То, что было задумано называть тюремной системой, было расистской идеей. Вы знаете, мы были созданы как расистская нация.Раньше мы были расистами. Мы были нацией, нацией. Каждая конструкция в нашем обществе является расистской с точки зрения структуры этого общества, которое мы называем системным расизмом. Так что, конечно, наша пенитенциарная система расистская. Кроме того, в них наблюдается более высокий уровень неравенства в системе, чем в большинстве тюрем. Я думаю, что часть этой работы — это то, что привело меня к работе справедливости для всех и к тому, что было в Коалиции за реформу расовой справедливости. Чтобы начать изучать некоторые из этих вещей, я пару раз разговаривал по телефону с генеральным прокурором сегодня утром, рассказывая о политике Сусаны по пунктам, которая действует прямо сейчас.Мы изучаем, как мы также реализуем политики, в которых проводится сбор данных о применении силы и соответствующем применении силы, деэскалации и политике межкультурной осведомленности. Я думаю, вы знаете, что эта и другие реформы во всей так называемой системе уголовного правосудия важны, как и во всех других системах государственного управления, и включают в себя жилье и образование, занятость, медицинские услуги, доступ. И я думаю, что большая проблема, о которой, кажется, никто не хочет говорить, на самом деле наносит нам наибольший ущерб.И это экономический, понимающий, что системный расизм — это несправедливо завоеванная политическая и экономическая власть белых и продолжающееся экономическое и другое неравенство ресурсов по расовому признаку, — цитирует Джо Фэган, автор книги «Расистская Америка», так что действительно тюремные системы расистские. Вся идея в том, и мы работаем над частью этого, и наша работа расширилась, чтобы охватить все системы правительства. И мы неустанно работаем над продвижением политики в этом направлении. И я бы просто добавил, говоря о выходе из расизма, вместо того, чтобы сидеть и болтать о том, что мы не расисты, вы знаете, сосредоточение внимания на системном расизме должно быть преднамеренным.Прежде всего, это должно быть экономически ориентировано. Есть несколько способов, которыми это должно выполняться одновременно, начиная с возраста, заканчивая сбором данных, политикой справедливости и интеграции, систематическим обучением расизму, оценкой расового воздействия на существующую и формирующуюся политику пересмотра расовой справедливости и процессов назначения, а также Процесс найма до точки Патрика в организационной интеграции для привлечения людей к ответственности. Но в чем? В двух словах, да. Тюремная система расистская.

Джейн Линдхольм: Табита Мур, учитывая то, о чем Марк только что говорил, вы знаете, это момент, когда, возможно, некоторые люди разговаривают или думают об этих проблемах так, как не думали раньше.Теперь для многих людей это постоянные разговоры. Но в данный момент, на что вы надеетесь или продвигаетесь прямо сейчас, чего, по вашему мнению, мы могли бы достичь в Вермонте и за его пределами?

Табита Мур: Что ж, я думаю, Марк указал на несколько законодательных положений, которые мы все сейчас пытаемся поддержать и пройти. И многие из них сейчас имеют дело с охраной. Но есть также некоторые другие инициативы в законодательном органе, которые поддерживают наших братьев и сестер Абенаки и наше ЛГБТКИА-сообщество.Все эти вещи важны, и важно, чтобы мы делали их как одно целое. Итак, законодательно здесь происходит многое, на что следует обращать внимание. Я думаю, что Ксусана указала, что у людей больше доступа. Так что, если вы прикованы к дому или даже если у вас нет времени, или вам интересно, я начинаю настраиваться на некоторые из проходящих заседаний комитета. Это будет критично. Вот некоторые из других вещей, которые мы настаиваем на более локальном уровне, особенно потому, что отдельные белые люди сейчас начинают говорить: о, черт возьми, это ужасно.Что мне делать? Вы признаете, что на рабочем месте у вас больше власти, чем вы думаете. Говорить о превосходстве белых таким образом, чтобы это показать, говоря о расовой несправедливости и говоря, как мы попали в это место в нашей системе и почему мы не говорим о расе? Этот неудобный разговор должен начаться. Способ, которым мы его увековечиваем, имеет решающее значение. И многие люди, которые никогда не думали об этой книге, говорят: ну, знаете, я не понимаю, как мы это делаем. Что ж, если вы не знаете, тогда вам нужно нанять эксперта или поговорить с людьми в вашем сообществе.Цветные люди или представители других бесправных групп населения, которые говорят, знаете ли, каков ваш здесь опыт?

Джейн Линдхольм: Итак, поскольку эти разговоры происходят и когда мы видим протесты, происходящие в Вермонте и по всей стране, мы получили записку от Шаана, который работал над проектами расовой справедливости во многих общинах Вермонта. И Шаан пишет и говорит: «Я заметил, сколько собраний в поддержку расовой справедливости появилось в последнее время. Некоторые из них связаны с лидерством цветных людей.Некоторые этого не делают. Это белые люди, которые чувствуют необходимость что-то делать. Это время, когда белые люди должны брать на себя лидерство, они должны брать лидерство у цветных. Одно собрание произошло вчера в Линдонвилле, а другое запланировано на эту пятницу в Сент-Джонсбери. Не было никакой связи с лидерами POC. Что участники дискуссии думали об этой особой причуде в Вермонте и что они посоветовали бы белым людям, желающим работать с цветными людьми, чтобы поддержать расовую справедливость значимым образом? Итак, Табита, что насчет этого? Вы знаете, что это момент для белых людей, чтобы подойти и подумать о вещах и, возможно, поговорить о них по-другому.Вы говорите. Но как насчет точки зрения Шаана, разве тогда вы не заглушите или не заговорите с голосами цветных людей в этом движении?

Джейн Линдхольм: Это своего рода прекрасный баланс, Шаан абсолютно прав в том, что если вы собираетесь говорить о расе и расизме так, как это проявляется в вашем старом возрасте, есть разговоры, в которых белые люди должны иметь сами по себе. Есть разговоры, которые чернокожие люди с представителями других рас могут вести наедине с собой. Но в то же время есть разговоры, которые нужно вести вместе.Итак, если вы собираетесь проводить публичные демонстрации, чтобы рассказать о своем возмущении расизмом, научите нас делать это без нас. В лучшем случае это небрежно. Так что подумайте о том, чего вы пытаетесь достичь. Если вы пытаетесь проявить солидарность с кем-то, вам, вероятно, следует убедиться, что эти люди а) хотят, чтобы эта солидарность была необходима именно таким образом. Так что чувствуйте себя комфортно с тем, как вы пытаетесь это сделать. Это не значит, что работа затем становится работой цветных людей, но белые люди действительно должны собираться и разговаривать с самими собой, а затем приближаться к цветным людям в их жизни, чтобы сказать, вы знаете, подходит ли это для который? Я думаю, также важно отметить, что это не означает, что все белые люди должны выйти и поговорить со своим черным другом и сказать: эй, я правильно делаю? Это означает, что вам нужно много работать над самообразованием.Думаю, кто-то упомянул книгу «Белая хрупкость». Это отличное место для начала для белых. А затем подумайте о том, как это повлияет на ваши реплики, как вы подходите к людям и будьте готовы к отпору. Этот разговор ведется веками. Это не новая информация. Я не думаю, что кто-то из нас говорит что-то такое, о чем черные и коричневые люди не говорили десятилетиями. Разница в том, что кто-то упомянул, как это называлось, прогресс, темп прогресса основан на наименьшем общем знаменателе? Нет, это правда.Вот что происходит. Гражданские права. Мы не зашли так далеко, потому что белые люди, по большому счету, забывают в те моменты, когда за неделю не убивают трех человек, это проблема. Так почему же, люди, я предлагаю вам пойти и купить, знаете ли, книги вроде «Белого плодородия». Кто-то упомянул «Нового Джима Кроу». Есть всевозможные ресурсы. Воспитывать себя. Поговорите об этом с другими белыми людьми. Нам не обязательно выслушивать ваши мысли по этому поводу. Нам нужно знать, что вы собираетесь с этим делать, чтобы изменить систему, от которой вы получаете выгоду.

Джейн Линдхольм: Марк, как вы думаете, настал ли момент, когда вы настроены оптимистично в отношении надежды, где, как вы думаете, могут быть изменения?

Марк Хьюз: Совершенно верно. Я всегда был оптимистом. Я как раз говорил об этом сегодня утром с хорошим другом, несмотря на то, на что мы здесь смотрим. И это то, что, знаете ли, чернокожие люди исторически всегда продвигали вперед, будь то наша религия, была ли это та евангельская песня или это была просто какая-то песня, даже если это песня в стиле R&B или просто что-то в сердце или что-то в духе, мы стойкие люди.Все будет хорошо. Так что я уверен, что мы, как нация, встанем по другую сторону этого вопроса. Я бы добавил к этому, чтобы сказать, что, знаете ли, я нахожу это, вы знаете, снова уместным и очень показательным, что мы находимся в точке, где смертность черных и коричневых людей тоже увеличилась до такой степени, что кажется, это было бы почти невыносимо для нас в этой стране. И я говорю «увеличился», потому что черные и коричневые люди умирали с непропорциональной скоростью, чем белые люди на протяжении всего английского колониального периода.Так что это не новая шляпа. Я бы сказал, что надежда есть. Знаешь, я думаю, что мы за белых людей, которые подходят к точке зрения Табиты, если ты сейчас появляешься на битве, я бы просто поприветствовал тебя. Спасибо, что пришли. Рад тебя видеть. И я бы также сказал, что, если вы когда-нибудь смотрели военный фильм, обращайте пристальное внимание на новичков, потому что то, что они должны делать, — это приходить и слушать. Им не положено создавать свой взвод.Им не положено найти другой холм, потому что, если они не будут осторожны, они могут кого-то ранить или того хуже. Так что добро пожаловать. Если вы притормозите на минуту, происходит много всего. Сделайте глубокий вдох. Мы справимся с этим. Если вы хотите посмотреть на Justiceforallvt.org. Посмотрите на vtracialjusticealliance.wordpress.com. У нас постоянно проходят вебинары. На них подписались сотни человек. Вы можете прыгнуть туда. Есть законодательная повестка дня, которая существует уже много лет.Теперь вы можете перейти на это, потому что это имеет смысл. Для вас это тоже должно иметь больше смысла. Итак, добро пожаловать в битву. Это мы еще даже до войны не добрались. И если вы хотите взглянуть на это с точки зрения спорта, возможно, мы только что прошли первый иннинг, но прямо сейчас мы находимся на стадии глобальной пандемии, когда черные и коричневые люди болеют и умирают на очень высоком уровне. непропорционально высокие проценты и нас просят вернуться к работе с очень непропорциональной скоростью, потому что мы не можем работать на работе, которая заставляет нас оставаться дома.В конце концов, экономика продолжает открываться, и в то же время мы имеем дело с довольно нестабильной ситуацией. Так что добро пожаловать. Теперь это наш мир. Большинство из вас сейчас должно увидеть, что не имеет значения, какую политику вы будете проводить, если не позаботитесь об этом первородном грехе. Вот где вы окажетесь.

Джейн Линдхольм: Что ж, оставим это пока. Как я уже сказал, в этом разговоре идет и много разных направлений. И, возможно, мы сможем сосредоточиться на будущих шоу только по одному из них за раз.И я ценю, что Марк и Табита, оба, поделились своими взглядами и идеями, как двигаться вперед с этого момента. Марк Хьюз является соучредителем и исполнительным директором организации «Справедливость для всех», которая занимается вопросами расовой справедливости в системе уголовного правосудия Вермонта. Он также является координатором по образованию Альянса расовой справедливости Вермонта и членом полицейской комиссии Берлингтона. Марк, спасибо тебе большое.

Марк Хьюз: Какое удовольствие. Заботиться.

Джейн Линдхольм: Ты тоже.Табита Мур является основателем и президентом NAACP региона Ратленд. Табита, очень приятно видеть тебя с нами. Спасибо.

Табита Морре: Спасибо за работу с нами.

Джейн Линдхольм: И теперь к нам присоединился Раджни Эддинс. Раджни — поэт, писатель, наставник и педагог. Приятно снова с тобой поговорить.

Rajnii Eddins: О, спасибо, что пригласили меня.

Джейн Линдхольм: Как вы себя чувствуете и думаете об этом конкретном моменте?

Rajnii Eddins: Я чувствую, что это время — решающая возможность для людей совершить столь провозглашенную революцию в человеческом сознании и морали, которые, кажется, постоянно страдают от этих трагедий.И обычно они локализуются как единичные случаи. Но похоже, что теперь у нас гораздо больше возможностей увидеть вопиющую реальность и взглянуть ей прямо в лицо.

Джейн Линдхольм: Вы думаете, что это действительно произойдет?

Rajnii Eddins: Я думаю, что пока у нас, вроде бы, захватывает дух времени, нет. Выбери это. Так что это зависит от всех наших работ в совокупности.

Джейн Линдхольм: Вы сейчас видите другой тон или тон разговора? Потому что вы знаете, что дело не в том, что вы этого не видели.Дело не в том, что вы не работали над вопросами равенства, расизма и культуры. Но вы говорите, что есть шанс, что те, кто еще не был, в том числе и те, кто у власти, могут сделать это сейчас, но на самом деле это не то, что вы можете контролировать. Видите ли вы здесь разницу в разговоре в целом? Ты думаешь?

Rajnii Eddins: Я думаю, что то, что мы видим сейчас, является новым, потому что это новый год. Это новый день. Исторически мы были замкнутыми кругами, но я думаю, что коллективно мы используем это как возможность действительно справедливо удовлетворить наши человеческие потребности.И это может быть трансформационным. Я надеюсь. Но я думаю, что это просто зависит от честности каждого отдельного человека как человеческого существа, чтобы претендовать на человечность как на приоритет больше, чем на белизну.

Джейн Линдхольм: Что ж, давайте перейдем к Рубену, который звонит из Вашингтона, округ Колумбия. Это Рубен Джексон, бывший сотрудник VPR, который больше не живет в Вермонте. Рувим, приятно слышать твой голос. Приятно говорить с тобой.

Абонент, Рувим: Ага. Как дела?

Джейн Линдхольм: Я в порядке.О чем ты думаешь? Как вы входите в этот разговор?

Звонивший, Рубен: Ну, это, может быть, более личное, и я не знаю, чтобы назвать гуманистическим, потому что это поэт во мне. Но одна из вещей, которые я хотел сказать и часто чувствовал, что живу там семь лет, — это изматывающая меня борьба. В конечном счете, это было основано на том факте, что вы должны иметь дело с реальностью не только в Вермонте, но и повсюду, что расизм носит системный характер. И я думаю, что так же, как добро, которое существует в Вермонте, у меня было много времени, чтобы укорениться, слава богу.Я думаю, что расизм глубоко укоренился. Итак. И, как и вся страна, Вермонт борется с тем, что я называю демографической тревогой. Это похоже на всех этих людей, которые не похожи на нас. А как мы справляемся с неизвестным — это как люди. Вторая часть этого — иметь дело с константой. Нет, здесь этого не происходит. Или людей, которые, да благословит их Бог, неверно цитируют конституцию штата. Поэтому мне часто казалось, что ты участвуешь в ринге, тебя кусают две собаки, и у тебя такие же укусы в ногу, когда ты идешь к врачу, и врач говорит: нет, здесь этого не было. .Итак, я подведу итог, за исключением того, что, возможно, есть над чем поработать. И я понимаю, что книги играют в этом свою роль, но на самом деле это похоже на то, чтобы залезть в грязь и увидеть, откуда каждый из нас, как мы раньше говорили, потому что, цитируя Бигги Смолла, он сказал: вы не знаете, но теперь вы знаете «, и я не осознавал, сколько прочтений у меня в руках, до этого последнего убийства. Я имею в виду, что я довольно злой человек, когда это будет служить, но я имею в виду, просто котлы и котлы гнева.Так что каждый из нас, будь то тревога или созерцание, вы знаете, просто сядьте и посмотрите, где мы, где мы находимся, и я думаю, идти вперед наилучшим образом.

Джейн Линдхольм: Рувим, я слышу тебя об этом. И я слышу, как вы, знаете, используя эту фразу, вы не знаете, ну, знаете. Раджни Эддинс, мы начали этот разговор с небольшого разговора о том, как родители могут разговаривать с детьми и как семьи и школы могут вести этот разговор. Вы также работаете с детьми. Как вы рассказываете молодым людям о том, что они здесь переживают и видят?

Rajnii Eddins: Я думаю, что величайший подарок, который вы можете сделать, один из величайших подарков, который вы можете предложить молодым людям, — это уважение и признание их собственного интеллекта и способности к критическому мышлению.Так что я думаю, что простое общение с ними с искренностью, желание выслушать и не опекать патерналистское отношение к молодежи — это очень долгий путь. И я думаю, вы знаете, молодежь часто замечает лицемерие взрослых, потому что они замечают дискомфорт, который мы испытываем. Иногда мы говорим честно о таких вещах, как раса и расизм. Но нам нужно облачиться в эту броню отваги и уважения к человеческому достоинству, чтобы служить им и служить примером.

Rajnii Eddins: Rajnii Eddins — поэт, писатель, наставник и педагог.На днях я попрошу вас прочитать в эфире собственное стихотворение. Так что мы должны будем вернуть тебя. Спасибо, что были с нами сегодня.

Райний Эддинс: Моя честь. Спасибо, что удержали место.

Джейн Линдхольм: Ксусана Дэвис. Знаете, есть какие-нибудь заключительные мысли о том, куда люди могут пойти с этим разговором, каким может быть следующий конкретный шаг для слушающего?

Сусана Дэвис: Да, вы знаете, во-первых, я прочитал работу Раджни.Да, покупайте «White Fragility» Робина ДиАнджело, но я купил книгу Раджни, и мне она больше нравится, потому что она очень глубокая и очень красноречивая. Я скажу, что, знаете, в этом разговоре мне вспоминается поговорка, которая есть у нас на испанском: «el maco no es pez porque está en el agua», что переводится как «нельзя называть лягушку рыбой, просто потому что он в воде «. И вы думаете о том, что сказала Табита. Она сказала, убедитесь, что людям не только нужна ваша помощь, но и что это правильный вид помощи, которую вы предлагаете.Поэтому очень важно, чтобы белые люди здесь связывались с цветными сообществами и не просто говорили: «Я хочу помочь», но удостоверились, что вы помогаете так, как это действительно нужно сообществу.

Джейн Линдхольм: Что ж, Ксусана, мы собираемся оставить это там, но мы продолжим этот разговор завтра, говоря о расе, идентичности и принадлежности в Вермонте. Я ценю тебя за то, что ты сегодня здесь. Ксусана Дэвис, исполнительный директор по расовому равенству штата Вермонт.Сусана, спасибо тебе большое.

Сусана Дэвис: Спасибо. Это было здорово.

Джейн Линдхольм: И снова мы продолжим это завтра. Я Джейн Линдхольм. Спасибо, что слушали Vermont Edition сегодня.

Губернатор продлил действие чрезвычайного положения в Вермонте до 15 июля

Губернатор Фил Скотт продлил действие чрезвычайного положения в Вермонте еще на месяц, несмотря на то, что он ослабил дополнительные ограничения, введенные в ответ на пандемию COVID-19.

На своем брифинге для прессы, который проводится трижды в неделю в понедельник, губернатор разрешил полностью открыться лагерям под открытым небом.Скотт сказал, что штат добился больших успехов в борьбе с распространением болезни.

Но он отметил, что чрезвычайное положение все еще необходимо, чтобы дать ему юридический механизм для реагирования в случае необходимости. Теперь он продлится до 15 июля.

«Мы должны помнить, что Вермонт — это не остров, и это еще не конец», — сказал Скотт. «У нас все еще около 130 000 активных дел в пяти часах езды от нас. Это около 20% нашего населения. Вот почему я проявил осторожность ».

«Мы должны помнить, Вермонт — это не остров, и это еще не конец.»- Губернатор Фил Скотт

В последние недели Вермонт разрешил предприятиям, в том числе отелям и гостиницам, вновь открыться. Губернатор также отменил карантинные требования для приезжающих за пределы штата из округов с небольшим числом заболевших. Позже это неделю, Скотт сказал, что он разрешит людям посещать дома престарелых и учреждения для престарелых.

Но Скотт и комиссар по здравоохранению доктор Марк Левин заявили, что штату необходимо очень внимательно следить, чтобы увидеть, не вызовут ли эти шаги вспышку COVID-19.Пока, сказал Левин, ослабление правил не привело к распространению болезни.

По словам Левина, в результате недавней вспышки в Винуски и Берлингтоне зарегистрировано 83 положительных случая. Но эта вспышка не является результатом открытия штата, как это произошло в других штатах.

«Нам все время задают вопрос:« Произошла ли эта вспышка в округе Читтенден из-за процесса повторного открытия? »И действительно, ничто не может быть дальше от истины», — сказал он. «И я думаю, мы бы увидели это на всем протяжении штата, если бы это было правдой.«

» Нам все время задают вопрос: «Произошла ли эта вспышка в округе Читтенден из-за процесса повторного открытия?» И на самом деле ничто не может быть дальше от истины. — Комиссар по здравоохранению д-р Марк Левин

Левин добавил, что чиновники здравоохранения видят признаки того, что вспышку болезни в округе Читтенден можно сдержать. — сказал он. — Но я хотел бы увидеть результаты целевого тестирования на этой неделе, когда у людей будет возможность прийти по предварительной записи, чтобы пройти тестирование в Берлингтоне и Винуски, прежде чем я положу конец вспышке, если вы буду.

Помимо 83 человек с положительным результатом теста, Левин говорит, что штат начал отслеживание контрактов еще с 78.

Комиссар по здравоохранению поделился слайдами Powerpoint, которые показывают, что в штате зарегистрировано 1128 случаев COVID-19; 912 человек выздоровели, 55 умерли. Число погибших не меняется уже две недели.

Если бы не недавняя вспышка болезни Виноски-Берлингтона, тенденция была бы еще лучше, сказал Левин.

«За последнюю неделю мы проводили в среднем 1364 теста в день, поэтому было много возможностей для тестирования, связанного с этой вспышкой, и по всему штату», — сказал он.«Процент положительных результатов остается очень, очень низким, значительно ниже 2%».

Скотт осуждает вандализм

Скотт осуждает вандализм по выходным, связанный с фреской Black Lives Matter, нарисованной на улице перед зданием Стейтхауса.

Губернатор сказал, что вандализм показывает, что Вермонту есть над чем бороться с расизмом.

Он добавил, что недавние убийства чернокожих, совершенные полицией, должны подтолкнуть страну к объединению, как это произошло после террористических атак 11 сентября и взрыва в Бостонском марафоне.

«Мы должны смотреть на это так же, — сказал Скотт. «Это слишком долго было нападением на черные жизни. И нам нужно заняться этим сейчас, в этот момент, и воспользоваться возможностью, чтобы сделать это, принять меры. Конечно, все жизни имеют значение, но черные жизни имеют значение прямо сейчас. И мы должны решить эту проблему ».

«Это нападение на черные жизни слишком долго. И нам нужно заняться этим сейчас, в этот момент, и воспользоваться возможностью, чтобы сделать это, принять меры». — Губернатор Фил Скотт

В то время как некоторые активисты призывали к освобождению полиции от финансирования, Скотт говорит, что не хочет сокращать бюджет полиции штата Вермонт.Вместо этого, по его словам, государству необходимо увеличить финансирование обучения сотрудников полиции и психиатрических работников для оказания помощи полиции.

Скотт сказал, что он действительно хочет положить конец практике Вермонта, отправляющей заключенных в исправительные учреждения за пределами штата из-за нехватки мест в учреждениях Вермонта. Он отметил, что с марта государство освободило от 300 до 400 ненасильственных преступников.

Больше от VPR: Ожидается, что мэр Берлингтона объявит о сокращении бюджета полиции

«Таким образом, мы резко сократили [количество заключенных] за последние три месяца.Честно говоря, я думаю, что нам нужно сделать так, чтобы мы остались там », — сказал Скотт. «А затем мы можем попытаться привезти… преступников из-за границы и попытаться доставить их сюда, в пределах наших границ».

По состоянию на понедельник Департамент исправительных учреждений сообщает, что 235 сокамерников Вермонта содержатся в частной тюрьме в Миссисипи из общего числа заключенных в 1398 человек.

Открытка с тыквенным полем: несмотря на пандемию, жаркое лето, они растут, продаются

Несмотря на жаркие, засушливые условия выращивания и пандемию, Winslow Farms, популярное место для выращивания тыкв в Питтсфорде, где можно самостоятельно собирать тыквы, процветает. .

«Лето для нас было очень сухим, очень жарким, — сказала хозяйка Андреа Уинслоу недавно днем. «Тыквы в основном находились в режиме выживания. Они очень непостоянны в том, как опылять, когда завязывают плоды; температура должна быть правильной. Итак, у нас есть урожай ».

Уинслоу добавил:« И то, что выросло, выглядит очень, очень хорошо, но это намного меньше, чем мы обычно собираем ».

Боб Херринг и Криста Абилдгаард из Вирджиния-Бич, штат Вирджиния, стояли в масках, когда их внуки катили несколько вагонов, полных тыкв, на цифровые весы, недавно установленные Уинслоу.

Уинслоу, закрыв лицо зеленым шарфом, смеялась, управляя движением и подсчитывая сумму покупки семьи. Она сказала, что этой осенью они были заняты.

«Нам очень повезло, что наш бизнес — это наш выбор, — сказал Уинслоу. «У нас есть пять акров, и есть даже открытые поля вокруг пяти акров, так что, вы знаете, вместе мы получили, вероятно, около 10 акров территории. И я думаю, что людям не терпится выйти на улицу и заняться чем-нибудь.

Она добавила, что большинство людей приходят как семейные единицы, поэтому они на самом деле не общаются с другими людьми, хотя они развлекаются и делают много семейных фотографий.

«Прошлая ночь была прекрасным днем ​​… и примерно в 16:30, ближе к вечеру, к нам зашла хорошая молодая пара, и они прошли через весь участок, оглядываясь по сторонам. И когда они вошли, мы предложили их сфотографировать, что мы довольно часто делаем. Они сказали: «О, мы только что обручились! Он только что сделал предложение на тыквенном грядке! »

Она добавила с ухмылкой: «Значит, это были особенные фотографии, с которыми мы старались быть осторожнее.»

У вас есть вопросы, комментарии или советы? Отправьте нам сообщение или свяжитесь с репортером Ниной Кек @NinaPKeck.

Мы закрыли наши комментарии. Подробнее о способах связи с номером можно найти здесь .

Vpr ВИЧ-1 увеличивает вирусную нагрузку, способствуя инфицированию тканевых макрофагов, но не неделяя CD4 + Т-клетки | Журнал экспериментальной медицины

Предыдущие эксперименты с эксплантатами лимфоидной ткани человека продемонстрировали, что вирус иммунодефицита человека типа 1 (ВИЧ-1) продуктивно инфицирует различные клеточные мишени, включая Т-клетки и тканевые макрофаги.Мы стремились определить конкретный вклад макрофагов и Т-клеток в общую вирусную нагрузку в лимфоидной ткани. Чтобы избирательно блокировать инфекцию макрофагов при сохранении инфекции Т-клеток, мы использовали вирусы, дефицитные по вирусному белку R (Vpr), которые проявляют глубокие дефекты репликации в неделящихся клетках in vitro. Мы инокулировали гистокультуры миндалин подобранными парами конгенных вирусов, которые отличались только наличием дикого типа или усеченного гена vpr . Хотя эти вирусы не показали снижения инфицирования или истощения Т-клеток, способность Vpr-дефицитного вируса R5 инфицировать тканевые макрофаги была серьезно нарушена по сравнению с подобранным вирусом R5 дикого типа.Интересно, что Vpr-дефицитный вирус R5 также продемонстрировал снижение общей репликации вируса на 50% по сравнению с его аналогом дикого типа, несмотря на тот факт, что макрофаги представляют собой небольшую часть потенциальных мишеней ВИЧ-1-инфекции в этих тканях. В совокупности эти данные подчеркивают важность тканевых макрофагов в локальной вирусной нагрузке и дополнительно указывают на роли CC-хемокинового рецептора 5, макрофагов и Vpr в жизненном цикле и патогенезе ВИЧ-1.

ВИЧ-1 является членом подсемейства лентивирусов ретровирусов.Среди особенностей, отличающих лентивирусы, является продуктивная инфекция клеток моноцитарного / макрофагального происхождения. Помимо генов gag , pol и env , обнаруженных во всех ретровирусах, геном ВИЧ-1 содержит шесть дополнительных генов: tat , rev , vif , vpr , vpu , и неф . Эти гены наделяют ВИЧ-1 рядом уникальных способностей, включая способность инфицировать нециклирующие клетки.В частности, известно, что вирусный белок R (Vpr) ^* играет важную роль в облегчении инфекции неделящихся тканевых макрофагов (1-6), а также в индукции остановки клеточного цикла G ₂ при делящихся Т-клетках (7-11 ). Ген vpr кодирует 96-аминокислотный нуклеофильный белок массой 14 кДа, который включается в зрелые вирионы посредством взаимодействия с p6, протеолитической субъединицей предшественника p55 ^gag (12-15). Хотя vpr часто удаляется во время пассирования in vitro, считается, что Vpr выполняет множество функций, которые способствуют становлению и патогенезу инфекции ВИЧ-1 in vivo (8, 16).

В отличие от простых ретровирусов, ВИЧ-1 не зависит от клеточного деления и сопутствующего разрушения ядерной оболочки для продуктивной инфекции (17, 18). Считается, что это особое свойство обусловлено согласованной и, возможно, избыточной активностью матрицы (MA), интегразы (IN), лоскута ДНК и Vpr. В частности, как MA (19–21), так и IN (22–24), связанные с вирусным геномом, содержат сигналы ядерной локализации, которые нацелены на преинтеграционный комплекс (PIC) в ядро ​​посредством взаимодействий с механизмом импорта ядер хозяина.Центральный лоскут ДНК, трехцепочечная спираль, общая для ретровирусов, может дополнительно способствовать ядерному нацеливанию посредством неизвестного механизма (25). Vpr также обладает высокой нуклеофильностью и использует особую стратегию нацеливания (1, 3–5, 26, 27). Он содержит два неперекрывающихся и уникальных сигнала ядерной локализации, которые, вероятно, способствуют ядерной локализации PIC (28, 29). Предыдущая работа идентифицировала Vpr как фактор, способствующий инфицированию макрофагов in vitro, что предположительно связано с этой функцией ядерной локализации (2, 4, 6).

Vpr также вызывает остановку клеточного цикла G ₂ в инфицированных клетках, культивируемых in vitro (7–11, 30). Экспрессия Vpr в некоторых типах клеток путем трансфекции, трансдукции или продуктивной инфекции ВИЧ-1 связана с инактивацией киназы p34Cdc2, что приводит к накоплению клеток в фазе G ₂ клеточного цикла (9, 11) . Биологическое значение этого останова при естественном инфицировании до конца не изучено.Однако исследования показали, что LTR ВИЧ-1 наиболее активен в фазе G ₂ , из чего следует, что арест G ₂ может придавать репликативное преимущество вирусным видам, кодирующим функциональный Vpr (8, 31, 32). Исследования in vitro также показали, что длительная остановка G ₂ может вызывать апоптоз инфицированной клетки (32–37), хотя другие не наблюдали этот эффект (36, 38, 39). Таким образом, Vpr может по-разному усиливать или опосредовать апоптоз, и эта функция, по-видимому, отделяется от остановки клеточного цикла в исследованиях мутагенеза (36).На основании этих исследований предполагается, что Vpr способствует опосредованному ВИЧ разрушению иммунной системы, способствуя истощению клеток-мишеней.

Чтобы прояснить важность Vpr для репликации ВИЧ и последующего патогенеза, мы использовали модель гистокультуры лимфоидов человека. Эта система отличается своей способностью поддерживать репликацию ВИЧ-1, ВИЧ-типа 2 (ВИЧ-2) или вируса иммунодефицита обезьян (SIV) без необходимости активации экзогенных клеток или факторов роста (40–44).Следовательно, эта система ex vivo сохраняет различные типы клеток и фенотипы клеточной активации и созревания, обнаруженные в лимфоидных тканях in vivo. Таким образом, гистокультуры селезенки и миндалин представляют собой ценную модель для изучения клеточного тропизма и цитопатического потенциала этих вирусов в физиологически значимых условиях. Поэтому мы использовали эту модель, чтобы определить, какие типы клеток Vpr играют роль в инфекции, и установить вклад этих клеток в вирусную нагрузку в лимфоидной ткани.Эти исследования показывают, что, хотя Vpr усиливает инфекцию макрофагов, он не способствует продуктивной инфекции пролиферирующих или покоящихся Т-клеток. Кроме того, Vpr-дефицитные вирусы R5 демонстрируют значительное снижение степени репликации вируса, что подчеркивает важность тканевых макрофагов как пермиссивного резервуара для репликации вируса in vivo. Эти данные свидетельствуют о том, что другие факторы хозяина или вирусные факторы могут быть ответственны за инфицирование лимфоцитов в состоянии покоя, и подчеркивают важность специфичности корецепторов Vpr и CC-хемокинов (CCR) 5 для ВИЧ-1-инфекции тканевых макрофагов.

После культивирования в течение 6 дней в стандартной гистокультуре среды с добавлением 5-бром-2′-дезоксиуридина (BrdU; 50 мкМ; Sigma-Aldrich) лимфоидные гистокультуры окрашивали на включение BrdU, как описано ранее (47). Вкратце, после этой инкубации клетки диспергировали, фиксировали и повышали проницаемость в течение ночи. Клетки промывали, обрабатывали ДНКазой, а затем иммуноокрашивали комбинацией mAb, распознающих CD4 (Becton Dickinson, клон SK3, конъюгированный с аллофикоцианином, разведение 1:40), CD45RA (BD PharMingen, конъюгированный с цихромом, 1: 2.5), CD62L (Becton Dickinson, конъюгированный с фикоэритрином, разведение 1:20) и BrdU (BD PharMingen, конъюгированный с флуоресцеинизотиоцианатом, разведение 1: 2,5). Затем собирали 50 000 лимфоцитов CD4 ⁺ и анализировали с помощью CELLQuest ™.

В указанные моменты времени (обычно через 2 недели после инокуляции) диспергированные клетки из инфицированных и неинфицированных лимфоидных гистокультуры иммуноокрашивали на маркеры клеточной поверхности CD3, CD4, CD8 и CCR5, как описано ранее (40, 41).Подсчитывали 5 000–20 000 лимфоцитов CD3 ⁺ и данные анализировали с помощью CELLQuest ™ и FlowJo. Истощение CD4 ⁺ Т-клеток выражали как отношение CD4 ⁺ к CD8 ⁺ Т-клеток в инфицированных тканях относительно неинфицированных, как описано ранее (40, 41). Были использованы следующие mAb от Becton Dickinson: анти-CD3 (клон SK7, конъюгированный с аллофикоцианином, разведение 1:80), анти-CD4 (клон SK3, конъюгированный с флуоресцеинизотиоцианатом, разведение 1:20) и анти-CD8 (клон SK1, конъюгированный с фикоэритрином, разведение 1:20).Также использовали следующее антитело от BD PharMingen: анти-CCR5 (конъюгированный с аллофикоцианином, разведение 1:20). Число клеток в инфицированных тканях было нормализовано к числам, полученным для неинфицированных контрольных тканей. Результаты представлены как среднее значение с SEM.

Чтобы изучить тропизм и репликацию Vpr-дефицитных вирусов в лимфоидной ткани, мы изучили подобранную пару вирусов, NL4–3 и 107. NL4–3 — это молекулярно клонированный штамм ВИЧ-1, который демонстрирует строгое предпочтение корецептору CXCR4 и не реплицируется в макрофагах (43, 45).107 представляет собой рекомбинантный вирус, происходящий из NL4-3, который имеет тот же генетический каркас, но включает в себя последовательности оболочки, определяющие корецептор, клонированные из BaL, CCR5-зависимого первичного изолята ВИЧ-1, а также дополнительные вышестоящие последовательности (45). Эти клонированные последовательности из BaL простираются через 3′-конец vpr и в результате этой замены существуют некоторые незначительные различия в аминокислотных последовательностях Vpr, происходящих от NL4-3 и 107 (Fig. 1 A). Однако геномы NL4–3 и 107 изогены перед vpr .Чтобы оценить функциональность этих белков, мы временно трансфицировали клетки 293T экспрессионными векторами, кодирующими HA-tagged NL4–3- или производные 107 версии Vpr. Вестерн-блот-анализ с использованием mAb против HA лизатов цельных клеток этих трансфектантов выявил несколько более низкую экспрессию 107 Vpr по сравнению с NL4–3 Vpr (рис. 1 B). Поскольку мутации или делеции на 3′-конце vpr могут изменять уровни экспрессии Vpr (48), мы делаем вывод, что различия в последовательностях генов NL4-3 и 107 vpr могут приводить к различиям в стабильности между двумя белками Vpr. приводя к дифференциальному выражению.Затем мы трансфицировали клетки 293T пустым вектором НА, производными от NL4-3 или 107 экспрессирующими векторами НА-Vpr и окрашивали клетки на предмет содержания внутриклеточной ДНК через 36 часов. Анализ клеточного цикла с помощью проточной цитометрии показал, что как NL4–3-, так и 107-Vpr индуцируют значительную остановку клеточного цикла G ₂ , тем самым устанавливая функциональность как NL4–3-, так и 107-Vpr in vitro (рис. 1C). ).

Для настоящих исследований мы хотели исключить экспрессию Vpr в NL4–3 и 107 вирусных клонах для сравнения с их соответствующими родительскими вирусами.Мы ввели делецию и два преждевременных стоп-кодона в нуклеотидную последовательность vpr как в провирусном контексте NL4–3WT, так и 107WT, тем самым генерируя NL4–3ΔVpr и 107ΔVpr, соответственно (рис. 1 D). Поскольку NL4-3 и 107 имеют идентичные последовательности перед сайтом EcoR1, используемым для удаления Vpr, эта стратегия клонирования сохраняет изогенность между NL4-3 и 107, включая vif и pol . Ни один из этих Vpr-дефицитных вирусов не продуцировал поддающихся обнаружению количеств усеченного продукта Vpr (данные не показаны).В соответствии с этим наблюдением иммуноблот-анализ вирионов дикого типа и мутантных вирионов установил присутствие Vpr в вирионах NL4–3WT и 107WT, но не в вирионах NL4–3ΔVpr и 107ΔVpr, подтверждая, что Vpr не экспрессируется в мутантах с делецией (рис. 1). E). Мы обнаружили более низкие уровни Vpr в вирионах 107WT по сравнению с вирионами NL4–3WT, что согласуется с предполагаемыми различиями в стабильности между этими различными версиями белков (рис. 1B). Сравнивая дикого типа и Vpr-дефицитные версии NL4-3 или 107, мы впоследствии исследовали клеточный тропизм и профили репликации этих вирусов в лимфоидных тканях человека ex vivo.

На основе морфологических характеристик мы ранее идентифицировали две отдельные популяции лимфоцитов в лимфоидных гистокультурах (47). Мы назвали одну популяцию клеток с небольшим размером, низкой гранулярностью и низкой пролиферативной активностью «лимфоцитами». Вторую популяцию, характеризуемую клетками большего размера, повышенной зернистостью и значительной пролиферативной активностью, назвали «бластами».«Хотя лимфоциты демонстрируют ограниченную пролиферацию, наши более ранние исследования прямо продемонстрировали продуктивную инфекцию неделящихся клеток в этой подгруппе (47). Эти результаты подтверждают, что инфицированные вирусом Т-лимфоциты не представляют собой субпопуляцию делящихся Т-клеток, и подтверждают, что ВИЧ-1 может продуктивно инфицировать неделящиеся лимфоциты de novo. Чтобы определить, вносит ли Vpr вклад в инфицирование этих неделящихся клеток, мы инокулировали ткань гистокультуры с эквивалентным TCID ₅₀ штаммов дикого типа или Vpr-дефицитных штаммов NL4–3 или 107.После 7-дневной инкубации клетки собирали из ткани и иммуноокрашивали на внутриклеточный p24, маркер продуктивной ВИЧ-инфекции. Исследование CD4 ⁺ Т-клеток с помощью FACS ^® выявило значительную инфекцию лимфоцитов и бластов диким типом и Vpr-дефицитными вариантами NL4–3 и 107 (рис. 2). Как наблюдалось ранее, инфекция NL4-3 приводит к более высоким уровням продуктивной инфекции, чем 107 из-за широкого распределения CXCR4 на клетках-мишенях и ограниченной экспрессии CCR5.Наиболее важно то, что в пределах данного провирусного скелета X4 (рис. 2 A) или R5 (рис. 2 B) штаммы дикого типа и Vpr-дефицитные штаммы эквивалентно инфицировали пул лимфоцитов, что позволяет предположить, что Vpr не является важным вирусным фактором для продуктивного инфицирование неделящихся или делящихся Т-клеток в таких тканях. Это открытие было неожиданным, учитывая предполагаемую роль Vpr в ядерном нацеливании PIC в неделящихся клетках, таких как тканевые макрофаги. Вирусы дикого типа и Vpr-дефицитные вирусы одинаково заражали бластный пул (рис.2, А и Б). Отметим, что было показано, что Vpr оказывает большее влияние на инфекционность ВИЧ-1 при низких титрах и лишь небольшое влияние при высокой множественности инфекции (m.o.i.) (22). Важно отметить, что описанные здесь эксперименты проводились на территории m.o.i. ниже 2 × 10 ^-4 , очень низкий посевной материал, что, вероятно, объясняет 5-дневную задержку появления детектируемого внутриклеточного и растворимого p24 после инокуляции. Эксперименты, проведенные с половиной использованного выше инокулята вируса, также не выявили различий в инфицировании CD4 ⁺ Т-лимфоцитов и бластов вирусами дикого типа или Vpr-дефицитными вирусами в этих условиях (данные не показаны).

Мы ранее продемонстрировали с помощью последовательного анализа, что наивные Т-клетки и Т-клетки памяти в этих тканях проявляют существенно разную пролиферативную активность (47). Поэтому мы предположили, что, хотя Vpr может не быть необходимым для инфицирования Т-клеток в целом, он, тем не менее, может быть критическим фактором для инфицирования непролиферирующей, наивной субпопуляции Т-лимфоцитов, популяции, обычно составляющей менее 20% от общего количества CD4 ⁺ Популяция Т-лимфоцитов.Чтобы измерить кумулятивную долю циклических Т-клеток во время типичной ВИЧ-инфекции, мы культивировали ткань миндалин в среде, содержащей BrdU, в течение 7 дней. Анализ FACS ^® образцов, собранных после маркировки, показал, что, хотя более 16% Т-лимфоцитов CD4 ⁺ памяти включали BrdU в течение этого периода, только 2,3% наивных Т-лимфоцитов CD4 ⁺ сделали это (рис. 3 A). . Этот паттерн усиленного мечения клеток памяти по сравнению с наивными клетками сохранялся и в бластном компартменте, хотя субпопуляции бластов в целом проявляли большую пролиферативную активность, чем их лимфоцитарные аналоги.

Затем мы сравнили способность вирусов дикого типа и Vpr-дефицитных вирусов продуктивно инфицировать каждый из этих подмножеств. Гистокультуры миндалин инокулировали эквивалентными титрами X4 или R5 вирусов дикого типа или Vpr-дефицитных вирусов, и после 7-дневной инкубации клетки иммуноокрашивали на маркеры созревания и внутриклеточный p24. Стратификация Т-клеток на подмножества памяти и наивные подмножества не выявила статистически значимых различий между культурами, инфицированными диким типом или Vpr-дефицитным NL4–3 (рис.3 Б) или 107 (рис. 3 В) вариантов. Наиболее важно то, что этот анализ продемонстрировал эквивалентную инфекцию неделящейся, наивной популяции Т-лимфоцитов вирусами дикого типа и Vpr-дефицитными вирусами. Это открытие подтверждает наш более ранний вывод о том, что Vpr не способствует инфекции лимфоцитов в целом, и, в частности, указывает на то, что функция Vpr незаменима для продуктивной инфекции непролиферирующей субпопуляции Т-клеток.

Чтобы напрямую определить, коррелирует ли эквивалентная инфекционность с эквивалентной цитопатичностью, мы измерили вызванное вирусом истощение CD4 ⁺ Т-клеток после инфицирования ВИЧ-1.Мы начали с подгруппы Т-клеток на основе экспрессии корецептора ВИЧ-1 CCR5. Как и ожидалось из предыдущих исследований, NL4–3WT экстенсивно истощил как CCR5 ⁺ , так и CCR5 ^— субпопуляции CD4 ⁺ T-лимфоцитов (рис. 5 A). Сходным образом, NL4–3ΔVpr также заметно истощал обе субпопуляции способом, неотличимым от его родительского вируса. В отличие от обширного истощения NL4–3, цитопатические эффекты 107WT были ограничены CCR5 ⁺ субпопуляцией CD4 ⁺ Т-лимфоцитов, как наблюдалось ранее (41, 43).Опять же, штамм 107 с дефицитом Vpr проявлял эквивалентную цитопатическую активность по сравнению со штаммом 107 дикого типа. Эти данные демонстрируют, что Vpr не является существенным для цитопатических эффектов ВИЧ-1 на Т-клетки CD4 ⁺ в лимфоидных тканях.

Чтобы определить, влияет ли состояние созревания Т-клеток на восприимчивость этих клеток к истощению Vpr-дефицитными вирусами, мы измерили потерю наивных лимфоцитов CD4 ⁺ памяти после инфицирования ВИЧ-1.И NL4–3WT, и NL4–3ΔVpr индуцировали серьезное истощение наивных лимфоцитов CD4 ⁺ памяти и CD4 ⁺ (рис. 5B), хотя цитопатические эффекты NL4–3ΔVpr были немного ниже, чем у NL4–3WT, что согласуется с нашими ранее обнаружение несколько сниженной инфекционности NL4–3ΔVpr. Мы также измерили истощение тканей, которые были инокулированы 107WT или 107ΔVpr. Как характерно для всех вирусов R5, общее истощение не было серьезным. Тем не менее степень истощения памяти и наивных популяций была эквивалентна для обоих 107 вариантов (рис.5 С). Таким образом, Vpr не способствует цитопатической активности вариантов R5 или X4 ВИЧ-1 в Т-лимфоцитах.

Помимо инфицирования активированных Т-клеток, вирусы R5 также продуктивно инфицируют клетки линии моноцитов / макрофагов. Поэтому мы исследовали предполагаемую роль Vpr в опосредовании инфекции неделящихся макрофагов лимфоидной ткани. Мы инокулировали гистокультуры миндалин с эквивалентными титрами 107WT или 107ΔVpr.После инкубации ткань диспергировали и клетки иммуноокрашивали на маркеры специфических макрофагов (CD14 и CD68) и Т-клеток (CD3), а также внутриклеточный p24. Поскольку макрофаги тесно связаны с В- и Т-клетками в лимфоидных тканях, макрофаги, свободные от комплексных Т-клеток (CD14 ⁺ или CD68 ⁺ и CD3 ^—), были идентифицированы проточной цитометрией и проанализированы на продуктивную инфекцию. В отличие от поведения, наблюдавшегося ранее в Т-клетках, 107ΔVpr продемонстрировал более чем четырехкратное снижение инфекционности в макрофагах лимфоидной ткани по сравнению с 107WT (рис.6 А). Аналогичное исследование той же ткани, инокулированной NL4–3WT и NL4–3ΔVpr, выявило мало обнаруживаемую инфекцию в макрофагах любым из вирусов (данные не показаны). Эти данные предполагают, что Vpr вносит значительный вклад в продуктивную инфекцию тканевых макрофагов штаммами R5.

Интересно, что в геномах ВИЧ-2 и SIV функции остановки и импорта в ядро ​​Vpr ВИЧ-1 разделены между двумя родственными генными продуктами, Vpr и вирусным протеином X (Vpx) (49).Остановка клеточного цикла опосредуется Vpr как у ВИЧ-2, так и у SIV, тогда как ядерная локализация опосредуется Vpx у обоих видов. Значение этого функционального разделения не совсем понятно; однако эволюционное сохранение обеих функций подразумевает их важность в жизненном цикле вируса. Чтобы определить, был ли дефект, специфичный для макрофагов, который мы наблюдали в 107ΔVpr, конкретно связан с активностью проникновения в ядро ​​Vpr, мы инокулировали образцы миндалин с SIV PBj6.6WT, PBj6.6ΔVpx или PBj6.6ΔVпр. Позже клетки были диспергированы и окрашены на маркеры происхождения макрофагов и внутриклеточный p27. Анализ FACS ^® выявил более чем шестикратное снижение количества продуктивно инфицированных макрофагов в ткани, инокулированной PBj6.6ΔVpx, по сравнению с тканью, инфицированной вирусом дикого типа (рис. 6B), что согласуется с ролью Vpx в ядерном наведении. Напротив, ткань, инфицированная PBj6.6ΔVpr, не показала значительного снижения частоты инфицированных макрофагов (рис.6 Б). Действительно, в нескольких экспериментах частота либо не изменилась, либо немного увеличилась по сравнению с PBj6.6WT. Следовательно, эти результаты предполагают участие ядерной целевой функции Vpr ВИЧ-1 в инфицировании макрофагов R5 ВИЧ-1.

Наконец, мы измерили степень и кинетику репликации вирусов дикого типа и Vpr-дефицитных вирусов в лимфоидных гистокультурах. Ткани инокулировали равными титрами NL4–3WT или NL4–3ΔVpr (рис.7 A), а также 107WT или 107ΔVpr (рис. 7B). Супернатанты собирали серийно в течение 18 дней инкубации, и концентрацию p24 в среде оценивали с помощью ELISA. Как и ожидалось из их строгого Т-клеточного тропизма и ранее полученных данных о сходной инфекционности, NL4–3WT и NL4–3ΔVpr обнаруживают сходные профили репликации (Fig. 7 A). Как общая кинетика роста, так и общая продукция вируса были одинаковыми. Напротив, для 107WT был обнаружен существенно иной образец репликации по сравнению с 107ΔVpr.107ΔVpr продемонстрировал снижение репликации вируса на ~ 50% по сравнению с 107WT (фиг. 7B). Основываясь на избирательных эффектах Vpr, которые мы наблюдали ранее в макрофагах, а не в Т-клетках, мы делаем вывод, что дифференциальный выход вируса в тканях, инфицированных 107ΔVpr, по сравнению с 107WT, является результатом уменьшения инфицирования макрофагов Vpr-дефицитными вирусами. Таким образом, эти результаты показывают значительный вклад тканевых макрофагов в вирусную нагрузку в лимфоидных тканях человека. В соответствии с этим выводом, количественное определение растворимого p27 в культуральной среде SIV-инфицированных тканей выявило восьмикратное снижение вирусного выхода из тканей, инокулированных Vpx-дефицитным штаммом PBj6.6 по сравнению с аналогами дикого типа и Vpr-дефицитными аналогами (данные не показаны). Таким образом, Vpx-дефицитный штамм SIV вел себя аналогично Vpr-дефицитному штамму R5 HIV-1. В целом, эти результаты предполагают, что основная роль Vpr в патогенезе ВИЧ-1 заключается в содействии инфицированию макрофагов, популяции, которая также может вносить существенный вклад в вирусную нагрузку у инфицированных людей.

Мононуклеарные клетки периферической крови в культуре обычно требуют экзогенной стимуляции, чтобы поддерживать продуктивную инфекцию вирусами дикого типа или Vpr-дефицитными вирусами.Эта зависимость от активации, по-видимому, связана с разрушением ядерной мембраны, связанным с индуцированным активацией клеточным делением, что, очевидно, устраняет необходимость в Vpr для облегчения ядерного импорта PIC. Напротив, Т-клетки в микросреде лимфоидной ткани допускают продуктивную инфекцию ВИЧ-1 независимо от экзогенной стимуляции или цитокинов. Более того, наши предыдущие исследования не выявили абсолютного ограничения инфекции ВИЧ-1, репликации или истощения Т-клеток в этих культурах на основе созревания или пролиферации клеток-мишеней (47).В частности, эти исследования продемонстрировали инфекцию de novo и истощение покоящихся, наивных лимфоцитов, что может объяснить наблюдение продуктивно инфицированных покоящихся Т-клеток in vivo (50–52). Поскольку эти клетки делятся очень редко (рис. 3), инфекция должна протекать независимо от растворения ядерной мембраны. Множественные детерминанты ядерного импорта способствуют этому уникальному свойству ВИЧ. Очевидная избыточность механизмов подчеркивает важность вступления ядер в жизненный цикл ВИЧ-1.Однако возможно, что отдельные импортные сигналы могут играть более или менее доминирующую роль в определенных клеточных контекстах. Таким образом, множественные сигналы ядерного импорта могут и не быть избыточными. Поэтому мы исследовали важность одного из таких сигналов ядерного импорта, Vpr, в обеспечении ядерного импорта в различных первичных типах клеток, включая неделящиеся Т-клетки и макрофаги.

Неожиданно эти исследования выявили эквивалентную инфекцию покоящихся, наивных Т-клеток в гистокультурах, инокулированных подобранными штаммами ВИЧ-1 дикого типа или Vpr-дефицитными штаммами, несмотря на дифференциальную инфекцию макрофагов.Это открытие предполагает, что другие факторы хозяина или вирусные факторы вносят вклад в ядерный импорт PIC в этой подгруппе неделящихся Т-лимфоцитов. По крайней мере, два дополнительных вирусных генных продукта могут быть ответственны за это. Мы предполагаем, что слабые сигналы ядерной локализации (NLS) в MA (19-21) могут относительно эффективно функционировать в T-клетках, что д. Снижать зависимость от Vpr-опосредованных механизмов транслокации. Кроме того, множественные NLS также были идентифицированы внутри вирусного IN (22–24), которые также могут быть относительно эффективными в отношении Т-клеток.В частности, недавно было показано, что новый NLS в IN вносит значительный вклад в инфицирование делящихся, а также клеток с задержкой роста (24). Наконец, нуклеофильные свойства центрального лоскута ДНК также могут играть более значительную роль в ядерном импорте PIC в инфицированные Т-клетки (25). Таким образом, каждый отдельный сигнал ядерного импорта в PIC может быть оптимизирован для конкретного первичного типа клеток.

Значение других функций Vpr в вирусной экспансии менее очевидно.Например, наш анализ инфицированных лимфоидных культур не смог обнаружить специфическую остановку клеточного цикла G ₂ в образцах, инокулированных ВИЧ-1 дикого типа, по сравнению с Vpr-дефицитным вирусом, что позволяет предположить, что Vpr-зависимая остановка не проявляется в этой ткани. контекст. Эти наблюдения также подтверждаются эквивалентной вирусной репликацией вирусов X4 независимо от присутствия Vpr. Альтернативно, возможно, что клетки, задержанные в G ₂ с помощью Vpr, могут быть быстро и избирательно элиминированы в лимфоидных гистокультурах, тем самым предотвращая их обнаружение.Однако эти исследования действительно выявили умеренное накопление клеток p24 ⁺ в фазе G ₂ клеточного цикла в ВИЧ-1-инфицированных культурах независимо от статуса Vpr. Это открытие подразумевает, что избирательное удаление Vpr-арестованных клеток не является вероятной особенностью этой системы, и предполагает, что вирусные факторы в дополнение к Vpr могут вносить вклад в арест в этом тканевом контексте. Действительно, предыдущее исследование продемонстрировало, что гликопротеин оболочки может вызывать остановку в культивируемых клетках (53).Индивидуальные вклады этих двух путей еще предстоит определить.

Мы также обнаружили эквивалентное истощение Т-клеток диким типом и Vpr-дефицитными вариантами ВИЧ-1. Хотя в более ранних исследованиях сообщалось о проапоптотической роли Vpr, наши результаты предполагают, что Vpr не требуется для таких эффектов в лимфоидной ткани. Действительно, исследования мутагенеза показали, что апоптотическая функция, приписываемая Vpr, по-видимому, отделяется от активности остановки клеточного цикла (36), и мы обнаружили, что ни одна из этих активностей не проявляется в этих гистокультурах.Мы пришли к выводу, что ни остановка клеточного цикла, ни апоптоз, индуцированный Vpr, не вносят значительного вклада в индуцированную вирусом гибель Т-клеток в этом контексте.

Идентичная кинетика репликации вирусов X4 дикого типа и Vpr-дефицитных вирусов в лимфоидной ткани согласуется с нашими более ранними выводами относительно инфекции X4 HIV-1 и истощения. Однако мы отмечаем, что в этих исследованиях была очевидна небольшая тенденция к снижению репликации Vpr-дефицитными штаммами, что может коррелировать с наблюдаемой тенденцией к незначительному снижению инфекционности и истощению Vpr-дефицитным вирусом X4.Хотя некоторые из этих различий достигли статистической значимости, эти закономерности наблюдались в нескольких образцах тканей, что может указывать на небольшой вклад Vpr в приспособленность и репликацию штаммов X4 HIV-1 in vivo.

В отличие от поведения культивированных Т-клеток периферической крови (2, 4, 54), макрофаги, происходящие из моноцитов, созревшие in vitro, в значительной степени зависят от интактного Vpr для продуктивной инфекции (2, 4, 6, 55).Однако этот эффект очевиден только при очень низкой множественности инфекции и только после нескольких недель культивирования in vitro. Действительно, некоторые исследователи не наблюдали эффекта Vpr на инфицирование культивируемых макрофагов, происходящих из моноцитов (56). Кроме того, важным вопросом, который остается без ответа в этих исследованиях, является важность Vpr для инфицирования макрофагов, находящихся в лимфоидных тканях. Лимфоидные органы являются основными местами репликации ВИЧ-1 in vivo и составляют> 90% вирусной нагрузки во время инфицирования ВИЧ-1 (57), особенно во время острой и бессимптомной фаз заболевания, когда преобладают вирусы, избирательно использующие CCR5.CCR5 экспрессируется на большинстве тканевых макрофагов, дендритных клетках и некоторых активированных Т-клетках. Выбор CCR5-зависимых вирусов во время острой инфекции предполагает, что макрофагальная инфекция может быть ключевым фактором в возникновении инфекции ВИЧ-1, а также в последующем развитии функционального иммунодефицита. Поэтому мы исследовали роль Vpr в установлении инфекции ВИЧ-1 в тканевых макрофагах, а не в искусственно созревших клетках крови. Наши результаты выявили существенный дефект в продуктивной инфекции макрофагов Vpr-дефицитными вирусами, что резко контрастирует с отсутствием его эффекта на Т-клетки.Этот фенотип, ограниченный макрофагами, также проявлялся в тканях, инокулированных Vpx-дефицитными, но не Vpr-дефицитными штаммами SIV. Эти наблюдения подтверждают особую важность ядерного импорта в жизненном цикле ВИЧ-1 и SIV в макрофагах. Более того, эти данные предполагают, что сигналы ядерного импорта в вирусной PIC могут быть специфичными для клеточного типа и не могут быть полностью избыточными во всех клеточных средах. В самом деле, каждый NLS в PIC может быть консервативным, чтобы сохранить способность ВИЧ-1 продуктивно инфицировать различные типы клеток.Мы пришли к выводу, что Vpr вносит существенный вклад в репликацию R5 ВИЧ-1 в макрофагах, но не играет значительной роли в Т-клетках.

Недавние исследования in vitro продемонстрировали, что экспрессия Nef ВИЧ-1 в макрофагах индуцирует продукцию растворимых CC-хемокинов, макрофагов, воспалительных белков-1α и -1β, а также других неидентифицированных растворимых факторов (58). Эти хемокины могут рекрутировать и частично активировать соседние лимфоциты в состоянии покоя и тем самым делать их доступными для инфицирования ВИЧ-1, что приписывает инфекции макрофагам важную роль в установлении инфекции в лимфоцитах в состоянии покоя.Селективное нарушение макрофагальной инфекции, как это видно на тестируемых здесь Vpr-дефицитных вирусах, должно прервать эту трансактивирующую функцию. Однако этот эффект не был очевиден в системе гистокультуры. В частности, частота инфицирования покоящихся, наивных Т-клеток с помощью 107ΔVpr или NL4–3ΔVpr была идентична частоте их аналогов дикого типа. Следовательно, экспериментальные условия или вирусные факторы, отличные от Nef или в сочетании с ним, могут играть ключевую роль в способности ВИЧ-1 инфицировать находящиеся в состоянии покоя, наивные лимфоциты в микросреде лимфоидной ткани.

Наконец, макрофаги могут вносить существенный вклад в вирусную нагрузку плазмы на поздней стадии инфекции, особенно когда CD4 ⁺ Т-клетки сильно истощены (57, 59, 60). Однако вклад макрофагов в вирусную нагрузку на других стадиях заболевания не был хорошо охарактеризован, но предполагается, что он минимален на основании вирусной и клеточной кинетики, наблюдаемой во время острого противовирусного лечения (61–64).Основываясь на предположении, что ВААРТ полностью подавляет репликацию вируса, такие исследования предполагают, что виремия в плазме снижается с периодом полураспада ~ 1 день, подразумевая, что клетки, выделяющие вирус в плазму, должны иметь аналогичный период полураспада. Этот вывод предполагает, что Т-клетки являются основным источником плазменной виремии, а не макрофагами инфицированной ткани, период полувыведения которых, как полагают, составляет около 2 недель (61–64). Однако более поздние исследования предоставили доказательства других устойчивых вирусных резервуаров, которые могут вносить вклад в плазменную виремию (65–68).Исследования, представленные в настоящем документе, обращаются к этому противоречию напрямую, исследуя кинетику репликации вирусов, которые не могут эффективно инфицировать макрофаги, в то время как их способность инфицировать и реплицироваться в лимфоцитах сохраняется. Таким образом, любое различие в вирусном выходе можно интерпретировать как вклад макрофагальной инфекции. Результаты показывают значительное снижение концентрации растворимого p24 в культурах, инфицированных 107ΔVpr, по сравнению с вирусом дикого типа. Этот результат коррелирует с более чем четырехкратным снижением частоты инфицированных макрофагов и сохранением количества инфицированных Т-клеток в тех же образцах.Таким образом, мы пришли к выводу, что дифференциальный выход между культурами, инфицированными диким типом и Vpr-дефицитным вирусом R5, объясняется выходом продуктивно инфицированного пула макрофагов.

Этот вывод подразумевает, что в лимфоидных органах, инфицированных вирусами R5, вклад инфицированных макрофагов в бесклеточный вирус равен вкладу всех инфицированных CCR5 ⁺ CD4 ⁺ Т-клеток в конкретной ткани — популяции, которая значительно превосходит ткань макрофаги не менее чем в 10 раз.Таким образом, на клеточной основе мы делаем вывод, что продуктивно инфицированные макрофаги кумулятивно выделяют по крайней мере в 10 раз больше p24, чем продуктивно инфицированные Т-клетки в той же ткани в течение 2-недельного временного интервала этих экспериментов. Таким образом, похоже, что репликация ВИЧ в макрофагах вносит значительный вклад в вирусную нагрузку на ткань и может составлять значительную часть плазменной виремии в той степени, в которой вирус плазмы происходит из тканевых источников. Однако остается теоретическая возможность, что Т-клетки, инфицированные вирусом, полученным из макрофагов, или в непосредственной близости от инфицированных макрофагов, могут продуцировать больше p24, чем клетки, инфицированные вирусом, полученным из Т-клеток или бесклеточным вирусом.Тем не менее, наши выводы хорошо согласуются с недавней работой, демонстрирующей значительную и устойчивую плазменную виремию у SHIV-инфицированных макак после индуцированного вирусом истощения Т-клеток CD4 ⁺ , в которой авторы пришли к выводу, что виремия поддерживалась вирусной репликацией в продуктивно инфицированных макрофагах. (60). Наши результаты расширяют это наблюдение, демонстрируя значительный вклад лимфоидных макрофагов человека в вирусную нагрузку ВИЧ-1 даже при наличии Т-клеток.

Учитывая тесную физическую связь между макрофагами и Т-клетками в лимфоидных органах, возможно, что большая часть вируса, продуцируемого макрофагами, может передаваться соседним лимфоидным клеткам посредством распространения от клетки к клетке.Вирус, продуцируемый макрофагами и передаваемый таким образом, может не вносить существенного вклада в бесклеточный вирус, обнаруживаемый в плазме. Как следствие, динамика снижения уровня вируса в лимфоидных тканях может отличаться от таковой в плазме. В прошлом считалось, что продуктивно инфицированные макрофаги лимфатических узлов, хотя и немногочисленные, играют большую роль в вирусной нагрузке (57, 59). Наши результаты подчеркивают потенциальную важность этого относительно небольшого клеточного резервуара вируса. Распространение вируса R5 непосредственно от макрофагов к Т-клеткам может вносить существенный вклад в индуцированный ВИЧ иммунный патогенез на ранних и бессимптомных стадиях ВИЧ-индуцированного заболевания, а также на более поздних стадиях заболевания, когда Т-клетки истощены.Таким образом, тканевые макрофаги могут представлять собой клинически важный клеточный резервуар вируса, поскольку можно ожидать, что вирус, полученный из макрофагов, будет вносить существенный вклад в прогрессирующее истощение Т-клеток, которое характерно для всех стадий заболевания ВИЧ.

Авторы благодарят Брюса Чезебро, Малкольма Мартина, Рут Коннор, Марио Стивенсона и Беатрис Хан за любезно предоставленные реагенты и Ди Дж.Holthe, Cecilia Stewart, Claudette Delphis, Ursula Perotti, Mark Weinstein, Nancy Abbey и хирургический персонал больниц Kaiser (Сан-Рафаэль, Сан-Франциско) и больницы общего профиля Сан-Франциско за щедрую помощь в получении образцов после тонзиллэктомии. Авторы выражают благодарность Мартину Бигосу, Валери Степпс и Скотту Фурлану за технические советы и помощь Хизер Гравуа, Джона Кэрролла и Джека Халла в подготовке этой рукописи. Мы также благодарим Марио Стивенсона за критическое чтение этой рукописи и за полезные предложения.

Д.А. Экстайн был поддержан Программой выпускников биомедицинских наук (BMS) и Программой подготовки медицинских ученых Национального института здравоохранения (MSTP) Калифорнийского университета в Сан-Франциско (UCSF). М.П. Шерман был поддержан грантом K08-AI01866 Национального института здравоохранения / Национального института аллергии и инфекционных заболеваний. М.Л. Пенн был поддержан BMS, Университетской программой исследований СПИДа, грантом Калифорнийского университета D99-GI-015 и Национальным институтом здоровья MSTP при UCSF.Эта работа была частично поддержана грантом Национального института здравоохранения R01-AI43695 (М.А. Голдсмит), Калифорнийским исследовательским центром СПИДа UCSF (CC99-SF-001, М.А. Голдсмит), Центром исследований СПИДа UCSF-GIVI (Национальные институты Health P30-MH59037, WC Greene) и Институты Дж. Дэвида Гладстона (MA Goldsmith и WC Greene).

Д.А. Экштейн и М. Шерман внес равный вклад в эту работу.

Сокращения, использованные в этой статье: BrdU, 5-бром-2′-дезоксиуридин; CCR, CC хемокиновый рецептор; IN, интеграза; МА, матрица; NLS — сигнал ядерной локализации; ПИК, прединтеграционный комплекс; SIV, вирус иммунодефицита обезьян; Vpr, вирусный белок R.

Цевьё Mak 90 magpul

Перейти к основному содержанию

Цевье Mak 90 magpul

Сельский институт Гандиграммы — Признанный университет

Д-р М. Сундаравадивелу, исполняющий обязанности вице-канцлера, выступил с приветственной речью на 35-м созыве, проведенном в GRI-DTBU 13-09-2019.

ДокторКанцлер GRI-DTBU К.М.Аннамалай выступил с Посланием к Президенту на 35-м созыве, проведенном в GRI-DTBU 13-09-2019

Шри Рамеш Похриял ‘Нишанк’, достопочтенный министр развития человеческих ресурсов, правительство Индии, награжден премией HONORIS CAUSA доктору В. Шанте на 35-м созыве, проведенном в GRI-DTBU 13-09-2019.

Шри Рамеш Похриял ‘Нишанк’, достопочтенный министр развития человеческих ресурсов, правительствоИндии, выступила с обращением 35-го созыва в GRI-DTBU 13-09-2019

Достопочтенный министр HRD выпустил свои переведенные книги நிஷங்க் கதைகள் & காத்திருப்பு (குறுங்காப்பியம்), а первый экземпляр получил доктор В. Шанта, директор Института рака, лауреат премии Chennai & Honoris Causa и капитан Раджеш Унни, основатель и генеральный директор Группа Synergy Marine и член Совета директоров в 35-м созыве в GRI-DTBU 13.09.2019

ДокторЛ. Раджа, профессор и руководитель, выступила с президентской речью на праздновании Международного женского дня в деревне Улагампатти, организованном Департаментом непрерывного обучения и повышения квалификации и UBA, GRI, Gandhigram 08.03.2021

Доктор С. Кавита Майтхили, доцент кафедры домашних наук, представил Специальное обращение на праздновании Международного женского дня в деревне Улагампатти, организованном Департаментом непрерывного обучения и повышения квалификации и UBA, GRI, Gandhigram 08.03.2021

Проф.П. Матхиваанан, бывший руководитель отдела тамильского языка Университета Бхаратидасана, выступил со специальным обращением в Международный день родного языка организована школой тамильского, индийского языка и сельского искусства при GRI — DTBU 23.02.2021.

Совет по навыкам сельского хозяйства Индии провел Оценка NSQF уровня 4 за 1-й курс B.Voc. Студенты ФЕОМ в ГРИ — ДТБУ 22.02.2021.

Д-р В.П.Р. Сивакумар, Регистратор, выступил с вступительной речью на Международной конференции «Математическое моделирование и методы вычислительного интеллекта», организованной Департаментом математики GRI-DTBU 10.02.2021

Доктор П. Кандасвами (Rtd.), Университет Бхаратиара, CBE, выступил с президентской речью на Международной конференции «Математическое моделирование и методы вычислительного интеллекта», организованной Департаментом математики GRI-DTBU 10.02.2021.

Доктор М.Р. Кубендран, вице-канцлер i / c, рассказал о ценностях и вкладе Ганди в общество, а также о цветах, преподнесенных в мемориале Махатмы Ганди вместе с регистратором, преподавателями и студентами накануне Дня памяти Махатмы Ганди в Гандиграмме 30 января 2020 г.

ДокторКубендран, вице-канцлер по связям с общественностью поднял Государственный флаг и передал Послание ко Дню Республики в GRI-DTBU 26.01.2021

Г-жа Индира Бэби и г-жа Валлимаил подняли Государственный флаг в 72-й День Республики в деревне Мелкарайпудур 26.01.2021

Д-р Л. Раджа, профессор и руководитель, д-р Р. Венкатарави, доцент и BoM, департамент LL&E и J.H. Састри, директор CUMI, Хосур обращается к кандидатам, которые пришли для выбора двухлетней программы обучения навыкам (одобрено NCVT), предлагаемой CUMI Murugappa Groups, Хосур, организованной Dept.LL&E в GRI (DTBU) 25.01.2021

Доктор В.П.Р. Сивакумар, регистратор и факультеты GRI отметили ДЕНЬ SMRITI и отдали дань уважения д-ру Г. Рамачандран, вице-канцлер-учредитель с 17.01.2021 г.

Доктор В.П.Р. Сивакумар, регистратор и факультеты GRI отметили ДЕНЬ SMRITI и отдали дань уважения д-ру Г. Рамачандран, вице-канцлер-учредитель с 17.01.2021 г.

Доктор М.Р. Кубендран, вице-канцлер и / с, присвоил степень доктора философии Б. Суганье, кафедра.сотрудничества по схеме Таткал вместе с доктором В.П.Р. Сивакумаром, регистратором, доктором М.Г. Сетураман, контролер экзаменационного контроля и преподаватели 12.01.2021 в GRI, Gandhigram

Доктор М.Р. Кубендран, вице-канцлер и / с, присуждал степень доктора философии П.Сутантиракумару, кафедре физики, по схеме Таткала вместе с доктором В.П.Р. Сивакумаром, регистратором, доктором М.Г. Сетураман, контролер экзаменационного контроля и преподаватели 12.01.2021 в GRI, Gandhigram

Исследовательская группа Центра непрерывного обучения и повышения квалификации GRI представила г-же А.Л.Минакаши, уполномоченный по защите детей Диндигульского района, Диндигул, 8 января 2021 г.

Доктор М.Р. Кубендран принимает на себя обязанности вице-канцлера i / c, Сельский институт Gandhigram, который считается университетом, Gandhigram 02.01.2021

Доктор Б. Суббурадж, вице-канцлер и / с, подписал Меморандум о взаимопонимании с Университетом Хавасса, Эфиопия, в присутствии доктора П. Баласубраманиама, сотрудника международных программ, доктора Б. Тамилмани, директора отдела исследований и разработок, доктора К. , Отдел сотрудничества через онлайн в GRI-DTBU 30.